| 抗菌抗癌肽CM4N在大肠杆菌中的融合表达与活性鉴定 |
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| 引用本文： | 陈玉清,秋雯,焦波,张杰,张双全. 抗菌抗癌肽CM4N在大肠杆菌中的融合表达与活性鉴定[J]. 药物生物技术, 2008, 15(3) |
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| 作者姓名： | 陈玉清 秋雯 焦波 张杰 张双全 |
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| 摘 要： | 为探讨内含肽intein在抗菌肽表达与纯化中的应用,采用递归PCR法合成CM4末端添加Asn的基因CM4N,克隆至E.coli表达载体pTYB11中,构建了与intein的C端融合的表达载体pTYYB11-CM4N.重组质粒转化至E.coli BL21(DE3)中进行IPTG诱导表达,融合蛋白intein-CM4N主要以可溶形式存在于胞内.利用载体中intein中的chitin结合域,将融合蛋白通过chitin亲和层析一步纯化,经DTT诱导intein的自我切割活性,实现CM4N在亲和柱上的切割与分离,透析冻干后得到了纯度95%以上的重组CM4N.活性检测结果显示,重组CM4N具有抗大肠杆菌、沙门氏菌和K562肿瘤细胞的活性.研究认为,内含肽在抗菌肽的基因工程中可能具有重要的应用前景.
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| 关 键 词： | 抗菌肽CM4 原核表达 intein融合 活性 抗菌 抗癌 大肠杆菌 融合表达 活性鉴定 Identification Activity Escherichia coli Peptide Antibacterial Expression 前景 基因工程 研究 肿瘤细胞 沙门氏菌 显示 结果 活性检测 冻干 |
Fusion Expression of Antibacterial and Antitumorial Peptide CM4N in Escherichia coli and Its Activity Identification |
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| CHEN Yu-qing,QIU Wen,JIAO Bo,ZHANG Jie,ZHANG Shuang-quan. Fusion Expression of Antibacterial and Antitumorial Peptide CM4N in Escherichia coli and Its Activity Identification[J]. Pharmaceutical Biotechnology, 2008, 15(3) |
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| Authors: | CHEN Yu-qing QIU Wen JIAO Bo ZHANG Jie ZHANG Shuang-quan |
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