| SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测BMI-1 mRNA方法的建立 |
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| 引用本文： | 陈凤花,胡丽华,王琳,李一荣,周志明. SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测BMI-1 mRNA方法的建立[J]. 山东医药, 2007, 47(29) |
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| 作者姓名： | 陈凤花 胡丽华 王琳 李一荣 周志明 |
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| 作者单位： | 华中科技大学同济医院附属协和医院,湖北武汉,430022 |
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| 摘 要： | 目的 建立SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR定量检测人类BMI-1 mRNA的方法.方法 以含有目的基因BMI-1 cDNA的质粒pEGFP-BMI-1为阳性模板,进行纯化和定量及系列稀释,应用SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测BMI-1,建立标准曲线,熔解曲线分析产物的特异性.结果 该法检测的线性范围为6.4×101～6.4×107拷贝,相关系数r为-1.00,6.4×103拷贝/反应的标本批内变异系数(CV)和日间CV分别为1.6%和2.8%.熔解曲线分析显示单一的峰,Tm为(80.40±0.18)℃.结论 SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR定量检测BMI-1 mRNA是快速有效、灵敏度高、特异性好的方法,可为BMI-Ⅰ的进一步研究奠定基础.
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| 关 键 词： | BMI-1 SYBR Green Ⅰ 荧光光度测定法 |
Quantification of human BMI-1 mRNA with SYBR Green Ⅰ real-time fluorescent polymerase chain reaction |
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| CHEN Feng-hua,HU Li-hua,WANG Lin,LI Yi-rong,ZHOU Zhi-ming. Quantification of human BMI-1 mRNA with SYBR Green Ⅰ real-time fluorescent polymerase chain reaction[J]. Shandong Medical Journal, 2007, 47(29) |
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| Authors: | CHEN Feng-hua HU Li-hua WANG Lin LI Yi-rong ZHOU Zhi-ming |
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