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人表皮干细胞的快速分离培养及鉴定
引用本文:林才,罗旭,辛国华,黄来剑,邱泽亮. 人表皮干细胞的快速分离培养及鉴定[J]. 上海交通大学学报(医学版), 2007, 27(6)
作者姓名:林才  罗旭  辛国华  黄来剑  邱泽亮
作者单位:1. 温州医学院附属第一医院烧伤科,温州,325000
2. 南昌大学附属第一医院烧伤科,南昌,330006
3. 浙江省温州市第三人民医院泌尿外科,温州,325000
4. 浙江省丽水市人民医院重症监护病房,丽水,323000
摘    要:目的 探讨人表皮干细胞的体外快速分离和培养方法.方法 运用Dispase Ⅱ酶和胰蛋白酶两步法从手术切除的人包皮组织中分离获得表皮干细胞.分离的表皮片经表皮干细胞培养基(ESCM)悬浮,接种于IV型胶原包被的培养板中,37 ℃、5%CO2 饱和湿度的细胞培养箱内静置培养10 min,留用贴壁细胞;Ⅳ型胶原黏附、分离并富集后继续培养.倒置显微镜下观察培养细胞的生长状况;检测细胞克隆形成率及克隆维持时间;免疫组化染色观察表皮干细胞标志物β1整合素和角蛋白19(K19)的表达.以角质形成细胞作为对照.结果 组织学观察显示,培养24 h后细胞呈克隆状生长;所分离、培养细胞的克隆形成率高于对照角质形成细胞,且克隆维持时间较长; 免疫组化染色显示,培养细胞β1整合素及Kl9均呈阳性表达.结论 运用Ⅳ型胶原黏附结合ESCM培养可以实现人成体表皮干细胞的快速分离和培养.

关 键 词:成体表皮干细胞  细胞培养  细胞分离  鉴定

Isolation, culture and identification of human epidermal stem cells
LIN Cai,LUO Xu,XIN Guo-hua,HUANG Lai-jian,QIU Ze-liang. Isolation, culture and identification of human epidermal stem cells[J]. Journal of Shanghai Jiaotong University:Medical Science, 2007, 27(6)
Authors:LIN Cai  LUO Xu  XIN Guo-hua  HUANG Lai-jian  QIU Ze-liang
Abstract:
Keywords:
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