| 人BTC蛋白表达及生物学活性鉴定 |
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| 引用本文： | 陈寒蓓,董艳,苏青. 人BTC蛋白表达及生物学活性鉴定[J]. 上海交通大学学报(医学版), 2007, 27(2) |
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| 作者姓名： | 陈寒蓓 董艳 苏青 |
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| 作者单位： | 上海交通大学,医学院新华医院内分泌科,上海,200092 |
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| 摘 要： | 目的 获得大量具有生物活性的人成熟β细胞素(BTC)蛋白.方法 以人胰岛细胞瘤cDNA为模板,PCR扩增BTC基因成熟蛋白编码区的全部序列,并按读框克隆入原核细胞表达载体pET32a(+)中,构建重组质粒pET32a(+)-hBTC.重组质粒转化大肠杆菌BL21,经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导及亲和层析法纯化获得融合蛋白,运用SDS-PAGE和Western blot进行鉴定.以不同浓度BTC连续5 d作用于NIH3T3细胞,MTT比色法检测细胞增殖能力.结果 融合蛋白以水溶性形式分泌于大肠杆菌BL-21胞浆中,其作用于NIH3T3细胞可明显促进细胞增殖.结论 人成熟BTC蛋白在pET32a(+)表达系统中得到高效表达,所纯化蛋白具有促进NIH3T3细胞体外增殖的作用.
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| 关 键 词： | β细胞素 克隆 表达载体 纯化蛋白质 |
Expression of human BTC with biological activity |
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| CHEN Han-bei,DONG Yan,SU Qing. Expression of human BTC with biological activity[J]. Journal of Shanghai Jiaotong University:Medical Science, 2007, 27(2) |
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| Authors: | CHEN Han-bei DONG Yan SU Qing |
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