成纤维细胞影响心肌细胞搏动频率的观察

目的：观察影响心肌细胞搏动频率的各种因素并探讨其作用。方法：实验于2003-05／2005—09于泰山医学院生化教研室、中心实验室完成。取新生的Wistar大鼠100只，无菌的取出心脏，培养不同浓度（0.5&;#215;10^5 cells/mL, 1.0&;#215;10^5 cells/mL, 1.5&;#215;10^5 cells/mL, 2.0&;#215;10^5 cells/mL）的心肌细胞和成纤维细胞，分别在培养的第2，3，4天，利用Recorder-8050磁带式录像机观察并记录心肌细胞的搏动频率。同时将培养的心肌细胞分别用不同浓度的成纤维细胞培养液（80％，50％，20％）和不同时间间隔的成纤维细胞培养液（2，4，6d）进行处理，在培养的第2，3，4天观察心肌细胞的搏动频率。最后采用内皮素受体阻断剂BQ123（1．0&;#215;10^-6 mmol／L）处理心肌细胞，观察并分析内皮素能否影响心肌细胞的搏动频率。结果：①心肌细胞单独培养时，其浓度越大，培养时间越长，搏动频率越高。②低浓度组（0．5&;#215;10^8 L^-1）的搏动频率在96h达高峰，高浓度组（2．0&;#215;10^8 L^-1）的搏动频率在96h达高峰，两者之间有显著性差异（88．9&;#177;5．8次／min．144.2&;#177;62次／min，P〈0．05）。③用成纤维细胞培养液培养心肌细胞，发现与对照组相比，第2天收集的培养液在48h时的作用最强（116．6&;#177;6．6次／min．89．7&;#177;4．2次／min，P〈0．05）；高浓度组在48h时的作用也最强，与对照组有显著性差异（100．3&;#177;7．9次／min，85．2&;#177;6．1次／min，P〈0．05）。④BQ123能显著降低成纤维细胞培养液诱发的增加细胞搏动频率作用（113．9&;#177;6．5次／min，95．1&;#177;5．次／min，P〈0．01）。结论：心肌细胞的搏动频率受多种因素的影响，是多种因素综合作用的结果。细胞的浓度、培养时间都能影响其频率；成纤维细胞培养液也能调节心肌细胞的频率；而内皮素可能是其发挥作用的关键物质之一。

Observation of the effect of fibroblasts on the beating rate of myocardial cells