续断皂苷Ⅵ诱导的脂肪间充质干细胞复合纳米羟基磷灰石/壳聚糖支架治疗大鼠桡骨骨缺损

目的:探讨续断皂苷Ⅵ诱导的大鼠脂肪间充质干细胞(ADMSCs)联合纳米羟基磷灰石/壳聚糖(n-HA/CS)人工骨材料修复大鼠桡骨骨缺损的效果。方法:应用细胞表面抗原鉴定ADMSCs。取传至第3代的ADMSCs,培养基中加入续断皂苷Ⅵ诱导15 d。诱导后的ADMSCs和n-HA/CS复合培养获得的植骨材料修复大鼠桡骨骨缺损模型,于术后第4、12周骨缺损区行X光拍片并按照改良Gray标准进行结果分析。H-E染色,并按改良Nilsson的组织学评分标准进行成骨效应评估。结果:ADMSCs呈成纤维细胞样贴壁生长,高表达CD44。续断皂苷Ⅵ诱导后的细胞呈三角形、矮方形及多边形。茜素红染色可见散在的红色阳性结节,骨钙素表达阳性,阳性细胞率85.46%±5.22%。骨缺损修复术后4周移植材料已部分被吸收。术后12周实验组部分新生骨皮质恢复连续,开始出现骨髓腔。改良Gray评分显示,在各时间点实验组均高于各对照组,差异有统计学意义。第4周行H-E染色可见植入支架部分被吸收,实验组支架间隙和周围均充满细胞。第12周实验组出现类似骨单位样结构,骨基质中为淡粉色。改良Nilsson评分显示实验组在术后的4周和12周均高于各个对照组,有统计学意义。结论:续断皂苷Ⅵ能够诱导大鼠ADMSCs分化为成骨细胞,复合n-HA/CS支架能很好修复骨缺损。