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冷冻保存对人精子膜蛋白PH-20和透明质酸酶活性的影响
引用本文:马晓萍,高晓勤,丁贤胜,周桦.冷冻保存对人精子膜蛋白PH-20和透明质酸酶活性的影响[J].解剖学杂志,2016(5).
作者姓名:马晓萍  高晓勤  丁贤胜  周桦
作者单位:1. 贵州医科大学组织学与胚胎学教研室,贵阳550004;遵义医药高等专科学校组织学与胚胎学教研室,遵义563006;2. 遵义医药高等专科学校组织学与胚胎学教研室,遵义,563006;3. 六盘水市人民医院病理科,六盘水,553000;4. 贵州医科大学附属医院生殖医学中心,贵阳,550004
基金项目:贵州省科技创新人才团队项目(黔科合人才团队[2014]4005号),贵州省科技计划项目(黔科合LH字[2015]7567号)
摘    要:目的:探讨冷冻保存对人精子膜蛋白PH-20和顶体内透明质酸酶活性的影响。方法:24例正常生育力精液标本行冷冻保存。免疫印迹检测PH-20蛋白在人精子中的表达,免疫荧光观察PH-20蛋白在人精子上的定位,采用改良透明质酸钠-明胶底物膜法检测精子顶体内透明质酸酶(HYD)活性(HYD阳性反应率、HYD活性强度)。结果:免疫印迹显示正常标本冷冻前、后精子均有PH-20蛋白的表达,其PH-20/β-actin平均光密度在正常组冷冻前为0.41±0.15;正常组解冻后为0.24±0.11,两者的平均光密度差异有统计学意义;间接免疫荧光染色后在荧光显微镜下观察冷冻前PH-20阳性率达72.88%±8.04%;解冻后PH-20阳性率降至46.97%±8.38%,差异有统计学意义;解冻后HYD活性与冷冻前比较均有显著性下降。结论:冷冻-解冻过程可引起精子PH-20蛋白表达减少和精子PH-20阳性率降低,以及受精过程中的关键酶-HYD活性减弱。

关 键 词:精子  冷冻保存  PH-20  透明质酸酶

Effect of cryopreservation on the expression of sperm surface protein PH-20 and the activity of hyaluronidase in human sperm
Abstract:
Keywords:sperm  cryopreservation  PH-20  hyaluronidase
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