活化型肝星状细胞中miRNA-193下调α-平滑肌肌动蛋白的表达 |
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作者姓名: | 王洁 曾宪一 王晓丹 王慧 柳长柏 吴江锋 张艳琼 |
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作者单位: | 1. 三峡大学医学院,宜昌443002;三峡大学肿瘤微环境与靶向治疗湖北省重点实验室,宜昌443002;2. 湖北工业大学校医院,武汉,430068;3. 三峡大学医学院,宜昌,443002 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(81200307/H0317),湖北省自然科学基金(2013CFB026) |
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摘 要: | 目的:研究活化型肝星状细胞(HSC)中miRNA-193(miR 193)下调肝纤维化相关基因的表达。方法:将大鼠miR-193的前体序列(pre-miR-193)克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+)中,经酶切和DNA测序鉴定,获得质粒pcDNA3.1-miR-193;通过脂质体转染法将质粒转染到大鼠的活化型肝星状细胞(HSC-T6)中,采用荧光素酶报告基因分析法和免疫印迹检测肝纤维相关基因的表达。结果:构建的真核表达载体pcDNA3.1-miR-193经酶切鉴定及DNA测序显示,目的片段的大小与预期结果一致;荧光素酶报告基因分析法和免疫印迹检测显示,重组质粒转染到活化型H-SC-T6中后,肝纤维化相关基因的α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达呈明显下降趋势,而胶原蛋白Ⅰα1和Ⅰα2的下调作用不明显。结论:miR-193能抑制活化型肝星状细胞中肝纤维化相关基囚α-SMA的表达。
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关 键 词: | 活化型肝星状细胞 miRNA-193 α-平滑肌肌动蛋白 Ⅰ型胶原蛋白 |
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