EHEC 0157：H7粘附Caco-2细胞缺陷突变株的构建

目的：构建对肠上皮细胞粘附缺陷的肠出血性大肠埃希菌O157：H7（EHEC O157）突变株，为体内、体外研究其粘附机制提供可用工具。方法：将pSC101和mini—Tn5Km2分别通过转化和结合导入O157Sakai菌株中，筛选粘附力缺陷的转化子感染Caco-2细胞株，观察Caco-2单层细胞中的微菌落数量和mini-Tn5Km2插入位点。结果：经诱变，共分离到3组粘附缺陷突变株，1组完全丧失了粘附力，2组粘附力减弱，3组的粘附力更弱。1组和3组拥有LEE岛上多基因的转座子插入，而2组mini-Tn5Km2的插入位点在LEE岛之外。结论：O157Sakai的肠道粘附能力可能与LEE岛的Ⅲ型分泌系统有关。