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结缔组织生长因子的克隆及其重组腺病毒的构建
引用本文:梁绍燕,康权,金先庆,罗庆.结缔组织生长因子的克隆及其重组腺病毒的构建[J].第四军医大学学报,2008,29(20):1829-1833.
作者姓名:梁绍燕  康权  金先庆  罗庆
作者单位:重庆医科大学附属儿童医院儿科研究所,重庆400014
摘    要:目的:克隆结缔组织生长因子(CTGF)及制备表达CTGF基因的重组腺病毒.方法:体外克隆出CTGF并将该基因采用定向克隆的方法克隆进入穿梭质粒pAdTrack-CMV中,进一步采用同源重组方法将该质粒和腺病毒质粒Adeasy-1连接,然后用脂质体介导的方法导入包装细胞HEK293中产生表达目的基因的重组腺病毒,收集病毒液感染HCT116 wt骨软骨肉瘤细胞,通过荧光显微镜观察GFP和Western Blot检测CTGF蛋白的表达.结果:经限制性内切酶检测和GFP表达证实成功地构建了携带该基因的重组腺病毒载体并制备出高滴度重组病毒,重组腺病毒转染后可使HCT116 wt细胞CT-GF蛋白表达明显增加.结论:成功构建了携带CTGF基因的重组腺病毒载体Ad5-CTGF,为探讨CTGF的作用机制、功能及与相关疾病的发生、发展上的进一步研究打下基础.

关 键 词:结缔组织生长因子  克隆  分子  重组  遗传  腺病毒科

Cloning of connective tissue growth factor gene and construction of recombinant adenovirus vector Ad5-CTGF
LIANG Shao-Yan,KANG Quan,JIN Xian-Qing,LUO Qing.Cloning of connective tissue growth factor gene and construction of recombinant adenovirus vector Ad5-CTGF[J].Journal of the Fourth Military Medical University,2008,29(20):1829-1833.
Authors:LIANG Shao-Yan  KANG Quan  JIN Xian-Qing  LUO Qing
Abstract:
Keywords:
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