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人多药耐药基因1在CHO细胞中的表达及功能研究
引用本文:辛中帅,奚涛,罗学刚,林超.人多药耐药基因1在CHO细胞中的表达及功能研究[J].中国药科大学学报,2005,36(6):594-598.
作者姓名:辛中帅  奚涛  罗学刚  林超
作者单位:中国药科大学生命科学与技术学院,南京,210009
摘    要:目的:构建人多药耐药基因(MDR1)的真核表达载体,转染CHO细胞,研究MDR1基因在真核细胞中的表达及功能.方法:将MDR1全长基因克隆到真核表达载体pcDNA3.1( ),利用阳离子脂质体转染CHO细胞,RT-PCR检测MDR1转染阳性细胞,并用G418筛选稳定表达MDR1基因的细胞,通过测定细胞对Rh123的外排作用以及对阿霉素的耐受性确定MDR1基因在正常细胞中的功能.结果:酶切鉴定和测序结果证明构建的重组表达载体pcDNA-MDR1序列正确.RT-PCR分析以及荧光显微镜观察结果表明:该重组表达载体已在CHO细胞中有效转录并稳定表达.Rh123外排和MTT药敏实验结果显示:转染pcDNA-MDR1的CHO细胞对Rh123外排作用显著高于未转染的CHO细胞,并且转染后的CHO细胞对阿霉素的耐药性也有显著提高.结论:成功构建了稳定表达MDR1并具有多药耐药功能的细胞株,有望成为多药耐药性药物研究的细胞模型.

关 键 词:MDR1基因  多药耐药  CHO细胞
文章编号:1000-5048(2005)06-0594-05
收稿时间:2005-06-07
修稿时间:2005年6月7日

Expression and Function Study of Multidrug Resistance Gene 1 in CHO Cells
XIN Zhong-Shuai,XI Tao,LUO Xue-Gang,LIN Chao.Expression and Function Study of Multidrug Resistance Gene 1 in CHO Cells[J].Journal of China Pharmaceutical University,2005,36(6):594-598.
Authors:XIN Zhong-Shuai  XI Tao  LUO Xue-Gang  LIN Chao
Abstract:
Keywords:MDR1 gene  Muhidrug resistance  CHO cells
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