转化生长因子β1对间皮细胞上皮-间质表型转化的调控及对胃癌腹膜转移的影响

目的：观察转化生长因子β1（TGF-β1）对腹膜间皮细胞上皮-间质表型转化的调控及对胃癌细胞腹膜转移的影响。方法 TGF-β1作用人腹膜间皮细胞系HMrSV5，倒置显微镜下观察间皮细胞形态学变化。采用Western-blot检测上皮细胞表型蛋白（细胞角蛋白和E-钙黏素）、间皮细胞表型蛋白（α-SMA和弹性蛋白）及Smad2蛋白水平的表达情况。采用黏附试验观察表型转化间皮细胞对胃癌细胞系HSC-39黏附的影响。间皮细胞（8×104／孔）与胃癌细胞系HSC-39（4×104／孔）共培养，采用体外Transwell侵袭实验观察腹膜微环境变化对胃癌细胞侵袭能力的影响。结果 TGF-β1作用腹膜间皮细胞24 h后部分细胞转变为狭长型，72 h后间皮细胞转变为典型纤维细胞样外观。TGF-β1作用间皮细胞可诱导弹性蛋白和α-SMA表达上调，细胞角蛋白和 E-钙黏素表达下降，并且呈现时间依赖性变化（P＜0．05）。 TGF-β1作用15 min后，间皮细胞内磷酸化Smad2表达开始升高，30 min达到顶峰，较对照组增加432％（P＜0．01）；但总Smad2表达则无明显变化（P＞0．05）。 TGF-β1作用72 h后，间皮细胞与HSC-39胃癌细胞的黏附率较对照组增加（146±17）％（P＜0．05）。胃癌细胞与TGF-β1刺激的间皮细胞共培养48 h后，平均每视野转移癌细胞数目为61．1±11．4，较对照组（31．9±8．1）明显增多（P＜0．05）。结论 TGF-β1能够诱导间皮细胞向成纤维细胞样转化，Smad2信号转导通路在间皮细胞表型转化中发挥重要作用；而这种腹膜微环境变化可增强胃癌细胞的黏附和侵袭能力，为癌细胞转移播散提供适宜的“土壤”环境。