Real time RT-PCR定量检测AFP mRNA表达水平方法的建立 |
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引用本文: | 聂常富,王建国,李荣,荆晓岳,王福利,何蕴韶.Real time RT-PCR定量检测AFP mRNA表达水平方法的建立[J].新乡医学院学报,2003,20(5):308-309,313. |
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作者姓名: | 聂常富 王建国 李荣 荆晓岳 王福利 何蕴韶 |
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作者单位: | 1. 新乡医学院第一附属医院,河南,卫辉,453100 2. 中山医科大学达安基因诊断中心,广东,广州,510089 |
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基金项目: | 20 0 2年河南省科技厅发展计划项目(0 2 2 463 0 0 3 2 ),2 0 0 3年河南省教育厅自然科学研究项目资助(2 0 0 3 3 2 0 14 6) |
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摘 要: | 目的 建立realtime逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)检测AFPmRNA表达水平方法。方法 提取BEL740 2细胞总RNA ,进行RT PCR扩增并纯化AFP基因片段 ,构建重组质粒 ,建立realtimeRT PCR检测AFPmRNA表达水平方法。结果 重组质粒的阳性克隆效率为 81.8% ,经酶切鉴定 ,目的基因片段已插入PMD 18T载体内 ,得到realtimeRT PCR动力学曲线。结论 成功建立了realtimeRT PCR定量检测AFPmRNA表达水平方法。
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关 键 词: | 甲胎蛋白 mRNA定量 逆转录聚合酶链反应 |
文章编号: | 1004-7239(2003)05-0308-03 |
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