11β-HSD1及皮质类固醇受体在兔糖皮质激素性高眼压模型睫状体组织中的表达

背景糖皮质激素的长期应用可能诱发敏感个体的眼压升高，研究证实11β羟类固醇脱氢酶1（11β—HSD1）及糖皮质激素受体（GR）、盐皮质激素受体（MR）可能影响房水的产生，这种机制是否与糖皮质激素性高眼压的发生有关目前国内外研究甚少。目的检测11β-HSDl及GR、MR在兔糖皮质激素性高眼压模型睫状体组织中的表达变化，探讨其在糖皮质激素性高眼压发病中的作用。方法采用随机数字表法将12～16周龄新西兰白兔13只随机分为对照组5只和实验组8只。实验组兔隔日在固定时间及固定地点于左眼球结膜下注射质量分数0．5％地塞米松磷酸钠注射液5mg（1ml），注射次日用质量分数0．5％地塞米松滴眼液点眼3次。每次注射后用氧氟沙星滴眼液点眼3次以预防感染，持续2个月；对照组兔以同法注射等容积无菌生理盐水，实验组兔眼压升高至18mmHg（1mmHg=0．133kPa）以上并能持续1周者为造模成功。实验组注射5周后以过量麻醉法处死各组实验兔，分离模型眼睫状体组织，采用免疫组织化学法检测和定位11β-HSD1蛋白在兔模型眼睫状体中的表达；采用逆转录-PCR（RT—PCR）法定量检测11β-HSDlmRNA、GRmRNA及MRmRNA在实验组兔模型眼睫状体组织中的表达，并与对照组兔眼进行比较。结果实验组采用地塞米松局部注射联合点眼后前2周眼压无明显升高，第1周与第2周问眼压差异无统计学意义（q=0．469，P〉0．05）；第3、4、5周眼压逐渐升高，与对照组比较差异均有统计学意义（q=10．535、20．353、28．681，P〈0．01），第5周时达（18．87±0．77）mmHg。免疫组织化学法检测显示，11β—HSDl蛋白在睫状体中呈阳性表达，位于非色素上皮细胞，但模型眼11β—HSDl的阳性染色强度明显弱于对照组。RT—PCR法检测显示，实验：组兔模型眼睫状体中MRmRNA、GRmRNA及11β-HSDlmRNA的相对表达量（以GADPH为内参）分别为2．22±0．78、0．64±0．11、0．47±0．16，而对照组分别为0．94±0．27、1．88±0．74、2．68±1．28，差异均有统计学意义（t=6．070，P=0．004；t=5．170，P=0．007；t=5．540，P=0．005）。结论外源性糖皮质激素性高眼压的发病可能与睫状体中MR表达的上调及11β—HSDl和GR表达的下调有关。