| 人大肠癌抗原基因cDNA噬菌体表达文库的构建和鉴定 |
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| 引用本文： | 陈航,方瑾.人大肠癌抗原基因cDNA噬菌体表达文库的构建和鉴定[J].细胞与分子免疫学杂志,2009,25(1). |
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| 作者姓名： | 陈航 方瑾 |
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| 作者单位： | 中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室,卫生部细胞生物学重点实验室,辽宁,沈阳,110001 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，辽宁省教育厅高等学校科学研究项目 |
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| 摘 要： | 目的:为获得大肠癌的特异性抗原基因,构建人大肠癌抗原基因的cDNA噬菌体表达文库.方法:从2株人大肠癌细胞CCL-187和CX-1中提取总RNA,分离纯化mRNA,并以此为模板合成第1链cDNA,用置换法合成第2链cDNA.双链cDNA经末端削平、EcoR Ⅰ接头连接、Xho Ⅰ酶切、过柱分级分离,除去＜400 bp片段.收集符合需要的cDNA片段与噬菌体ZAP Express载体连接,体外包装后获得人大肠癌抗原基因的cDNA噬菌体表达文库.结果:构建的人大肠癌抗原基因的cDNA噬菌体文库,原始库容量为2.3×109 pfμ/L,重组率97%.重组子插入cDNA片段平均大小1 kb以上.结论:成功地构建高质量的人大肠癌抗原基因的cDNA噬菌体表达文库,为大肠癌的特异性抗原筛选奠定了基础.
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| 关 键 词： | 人大肠癌 噬菌体 cDNA表达文库 |
Construction and identification of cDNA library for colorectal carcinoma antigens |
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| CHEN Hang,FANG Jin.Construction and identification of cDNA library for colorectal carcinoma antigens[J].Journal of Cellular and Molecular Immunology,2009,25(1). |
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| Authors: | CHEN Hang FANG Jin |
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