临床表葡菌gyrA、gyrB、grlA和grlB基因突变与其对环丙沙星耐药性的关系

用平皿二倍稀释法测定18株表葡菌对环丙沙星的MIC（0．125—128μg／ml）。分别针对表葡菌中gyrA、gyrB、grlA、grlB等四种基因进行引物设计与合成，提取基因组DNA，PCR扩增，对PCR产物进行克隆、鉴定并测序，用DNASIS软件分析测序结果。在表葡菌的GdA中，只有Ser80→Phe、Ser80→Tyr或Asp84→Asn、Asp84→Ala、Asp84→Tyr的改变。在GyrA中，存在ser84→TYr、ser84→Phe、Glu88→Lys的改变；在任一株表葡菌中未见有gyrB或grlB的突变。在被检测的18株临床分离表葡菌中有3个分离株对环丙沙星的MICs≤0．5μg／ml，在GyrA或GrlA的决定区没有变化。对环丙沙星的MICs≥2μg／ml的15个分离株中，GyrA中有Ser84和Glu88及GdA中的Ser80和Asp84的氨基酸改变。1株MIC为2μg／ml的GdA中发生一个氨基酸改变，而GyrA中无变化。说明拓朴异构酶Ⅵ可能是环丙沙星作用于表葡菌的首要靶位酶。在高水平耐药株中，在GdA和GyrA中均存在多位点的突变，提示耐药水平的高低与GdA、GyrA位点的突变直接相关。

Relationship of grlA, grlB, gyrA and gyrB mutations and ciprofloxacin resistance in clinical isolates of Staphylococcus epidermidis