| RNA干扰技术抑制鼻咽癌细胞内源性绿色荧光蛋白的表达 |
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| 引用本文： | 王祎琴,彭惠,洪苏玲. RNA干扰技术抑制鼻咽癌细胞内源性绿色荧光蛋白的表达[J]. 重庆医科大学学报, 2007, 32(8): 822-825,834 |
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| 作者姓名： | 王祎琴 彭惠 洪苏玲 |
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| 作者单位： | 重庆医科大学附属第一医院耳鼻咽喉头颈外科,重庆,400016;重庆医科大学附属第一医院眼科,重庆,400016 |
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| 摘 要： | 目的:建立稳定表达绿色荧光蛋白(GFP)的鼻咽癌细胞株;观察不同转染浓度的短发卡状RNA对鼻咽癌细胞内源性GFP的抑制效率及细胞毒性.方法:转染pEGFP-N1至鼻咽癌细胞株HNE1,G418筛选获得稳定表达GFP的HNE1-GFP细胞株;利用针对GFP基因的短发卡状RNA表达载体shGFP,以不同浓度shGFP转染HNE1-GFP,荧光显微镜观察细胞荧光强度,软件分析荧光抑制效率,MTT检测细胞毒性,RT-PCR检测GFPmRNA水平改变,Western Blot检测GFP蛋白水平改变.结果:绿色荧光稳定表达于传代HNE1细胞中;shGFP能够显著抑制该细胞中GFP的表达,抑制效率分别为49.7%,84.8%,86.7%且无细胞毒性;GFP在mRNA和蛋白水平的表达均有明显下降.结论:稳定表达GFP的鼻咽癌细胞株成功建立;RNA干扰载体可抑制鼻咽癌细胞中GFP的表达,其抑制效率有明显的浓度依赖性且无明显细胞毒性.该系统能够用于鼻咽肿瘤的RNA干扰机制研究中.
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| 关 键 词： | 鼻咽肿瘤 绿色荧光蛋白 短发卡状RNA RNA干扰 |
| 文章编号： | 0253-3626（2007）08-0822-04 |
| 修稿时间： | 2006-11-03 |
The inhibition of intrinsic expression of GFP in nasopharyngeal carcinoma by RNA interferencing |
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| WANG Yiqin,et al. The inhibition of intrinsic expression of GFP in nasopharyngeal carcinoma by RNA interferencing[J]. Journal of Chongqing Medical University, 2007, 32(8): 822-825,834 |
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| Authors: | WANG Yiqin et al |
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| Affiliation: | Department of Otolaryngology,the First Affiliated Hospital, Chongqing Medical University |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Nasopharyngeal neoplasms Green fluorescent protein Short hairpin RNA RNA interference |
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