| 重组大鼠质粒pEGFP-GDNF的构建及真核细胞转染 |
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| 引用本文： | 刘文文,王晓梅,赵永波,吴云成. 重组大鼠质粒pEGFP-GDNF的构建及真核细胞转染[J]. 中风与神经疾病杂志, 2005, 22(2): 104-106 |
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| 作者姓名： | 刘文文 王晓梅 赵永波 吴云成 |
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| 作者单位： | 上海交通大学附属第一人民医院神经科,上海,200080 |
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| 基金项目： | 上海市重点基金资助项目(024119037);上海市引进海外高层次留学人员专项基金资助项目(2004-1-5) |
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| 摘 要： | 目的 构建携带大鼠胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)基因的真核细胞表达载体,为应用GDNF进行如帕金森综合征之类的神经元退化性疾病的基因治疗打基础。方法 采用RT- PCR方法从大鼠胎脑组织总RNA中扩增出该基因的c DNA序列,并克隆到增强型绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因的真核表达载体p EGFP- C1中,对重组质粒p EGFP- GDNF进一步鉴定。采用电转及阳离子脂质体将重组质粒p EGFP- GDNF转染至SH- SY5 Y细胞。结果 大鼠GDNF c DNA已正确地克隆到真核表达载体p EGFP- C1中,而构建成重组大鼠质粒p EGFP-GDNF。GDNF基因可稳定表达在细胞中。结论 真核细胞表达载体p EGFP- GDNF以及表达GDNF工程细胞SH-SY5 Y的成功构建,为进一步开展GDNF基因治疗PD等中枢神经系统疾病奠定了基础。
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| 关 键 词： | 胶质细胞源性神经营养因子 真核表达载体 重组 基因治疗 转染细胞 |
| 文章编号： | 1003-2754(2005)02-0104-03 |
| 修稿时间： | 2004-09-20 |
The experimental study of construction of recombinant plasmid pEGFP-GDNF and its expression in eukaryotic cell |
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| LIU Wen-wen,WANG Xiao-mei,ZHAO Yong-bo,et al.. The experimental study of construction of recombinant plasmid pEGFP-GDNF and its expression in eukaryotic cell[J]. Journal of Apoplexy and Nervous Diseases, 2005, 22(2): 104-106 |
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| Authors: | LIU Wen-wen WANG Xiao-mei ZHAO Yong-bo et al. |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | GDNF Recombinant plasmid Gene therapy Transfecte |
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