| 小鼠B7-H3-Fc融合蛋白的表达及其生物学活性的研究 |
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| 引用本文： | Yan RH,Zhang GB,Sun J,Fu FQ,Zhang XG. 小鼠B7-H3-Fc融合蛋白的表达及其生物学活性的研究[J]. 细胞与分子免疫学杂志, 2010, 26(11): 1067-1069 |
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| 作者姓名： | Yan RH Zhang GB Sun J Fu FQ Zhang XG |
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| 作者单位： | 1. 苏州大学医学生物技术研究所,江苏苏州215004;苏州大学附属第二医院检验科,江苏苏州215004
2. 苏州大学医学生物技术研究所,江苏苏州,215004 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 |
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| 摘 要： | 目的:制备B7-H3-Fc融合蛋白,研究其对T细胞的共刺激作用。方法:首先采用PCR技术分别从pMD19-T/小鼠B7-H3和pMD19-T/hIgG1(Fc)重组载体中扩增出小鼠B7-H3胞外段基因和人IgG1重链Fc恒定区基因。通过重叠PCR技术将2段基因连接成B7-H3-Fc,经EcoR I和BglII双酶切后插入真核表达载体pIRES2-EGFP构建成pIRES2-EG-FP/B7-H3-Fc重组载体。脂质体法转染CHO细胞,经G418加压筛选能稳定分泌表达小鼠B7-H3-Fc融合蛋白的基因转染细胞,并经Western blot鉴定。该转基因细胞无血清培养后,收集细胞上清、超滤浓缩后行经Protein G柱纯化,获得纯品B7-H3-Fc融合蛋白。通过CCK-8以及ELISA方法检测小鼠B7-H3-Fc融合蛋白对T细胞体外增殖及细胞因子分泌的影响。结果:成功地构建了能稳定表达B7-H3-Fc融合蛋白基因的CHO转基因细胞株,该融合蛋白能够剂量依赖性地促进T细胞体外增殖及IL-2和IFN-γ等细胞因子分泌。结论:本研究提示B7-H3作为重要的共刺激分子,在调节T细胞免疫应答中发挥了正性共刺激作用。
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| 关 键 词： | 融合蛋白 小鼠 T细胞 协同刺激分子 |
Expression of mouse B7-H3-Fc fusion protein and characterization of its bioactivity |
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| Yan Ru-hong,Zhang Guang-bo,Sun Jing,Fu Feng-qing,Zhang Xue-guang. Expression of mouse B7-H3-Fc fusion protein and characterization of its bioactivity[J]. Chinese journal of cellular and molecular immunology, 2010, 26(11): 1067-1069 |
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| Authors: | Yan Ru-hong Zhang Guang-bo Sun Jing Fu Feng-qing Zhang Xue-guang |
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| Affiliation: | Institute of Biotechnology, Clinical Diagnosis Laboratory of the Second Affiliated Hospital, Soochow University, Suzhou 215004, China. |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | B7-H3 |
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