布氏杆菌周质蛋白 EipB优势T-B联合抗原表位预测及其免疫应答特点

目的 利用生物信息学方法预测布氏杆菌周质蛋白(Brucella periplasmic protein, EipB)的理化性质、空间结构以及T、B细胞表位，探讨T、B优势表位肽的免疫效应，为布氏杆菌分子肽疫苗的筛选奠定基础。方法 利用在线网站以及生物信息学相关数据库分析EipB蛋白的理化性质、跨膜结构域，信号肽序列，二级和三级结构、亲/疏水性以及该蛋白的T、B抗原表位。选取抗原性最高的B和T表位(分别位于121-137和95-110)通过血蓝蛋白进行连接，免疫小鼠后，通过ELISA检测IgG、IgM、IgA以及IgE等抗体的产生情况；通过流式细胞术检测T细胞分泌细胞因子的情况。结果 布氏杆菌EipB蛋白是由279个氨基酸组成，呈弱碱性，分子质量为31 kDa,性质较为稳定；该蛋白在26-27氨基酸之间含有一个信号肽序列，在1-30氨基酸之间含有一个跨膜结构域；二级结构中α-螺旋，β-转角，延伸连和无规则卷曲等结构；亲水区域明显；该蛋白含有21条优势B细胞表位肽，这些优势B细胞表位所在氨基酸区段与亲水性较高区域相对应。含有CD₄⁺T细胞表位56...