食管鳞状细胞癌YES-2细胞顺铂耐药致其恶性生物学行为及PD-L1表达的变化

目的：探讨食管鳞状细胞癌（esophageal squamous cell carcinoma，ESCC）YES-2 细胞顺铂（cis-dichlorodiammine platinum，CDDP）耐药后（YES-2/CDDP-R）细胞恶性生物学行为的变化和程序性死亡受体-配体1（programmed cell death-ligand 1 ，PD-L1）表达的变化。方法：用CDDP 由低质量浓度到高质量浓度（0.25~2.0 μg/ml）间断冲击（间隔15~25 d）的方法处理YES-2 细胞，建立CDDP耐药细胞株YES-2/CDDP-R。倒置显微镜下观察YES-2/CDDP-R 细胞的形态学变化，MTT法检测细胞对CDDP敏感性的变化，划痕愈合实验检测耐药前后细胞迁移能力的变化，qPCR和Western blotting 检测耐药前后细胞中PD-L1 mRNA和蛋白表达水平的变化。结果：经过CDDP梯度给药9 个月后成功建立YES-2/CDDP-R 细胞。显微镜下见YES-2/CDDP-R 细胞的形态大小不一、胞内空泡及黑色颗粒明显增多且出现巨大细胞。与YES-2 细胞比较，YES-2/CDDP-R细胞的IC50值显著升高，表明其对CDDP的敏感程度降低（P<0.05）；YES-2/CDDP-R 细胞的增殖和迁移能力显著增强（P<0.05 或P<0.01），PD-L1 mRNA和蛋白表达水平显著升高（均P<0.01）。结论：成功建立的CDDP耐药细胞株YES-2/CDDP-R 对CDDP的敏感程度降低，其增殖和迁移能力增强。YES-2/CDDP-R 细胞中PD-L1 表达水平升高，提示CDDP耐药可能通过上调YES-2细胞PD-L1表达水平促进免疫逃逸。

Transformation of malignant biological behaviors and PD-L1 expression in esophageal squamous cell carcinoma YES-2 cell induced by CDDP resistance