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| 基于幽门螺杆菌UreB优势抗原表位多抗原肽疫苗制备及其免疫保护作用 | |
| 引用本文： | 王艳芳,王欢,张慧,严杰,阮萍.基于幽门螺杆菌UreB优势抗原表位多抗原肽疫苗制备及其免疫保护作用[J].中华微生物学和免疫学杂志,2012,32(3). |
| 作者姓名： | 王艳芳 王欢 张慧 严杰 阮萍 |
| 作者单位： | 1. 310036,杭州师范大学基础医学部 2. 浙江大学医学院病原生物学系, 杭州,310058 3. 浙江树人大学生物工程学院 4. 312000,绍兴文理学院医学院检验系 |
| 基金项目： | 浙江省教育厅科研计划项目 |
| 摘 要： | 目的 构建串联式幽门螺杆菌UreB抗原优势表位UreB322和UreB527原核重组表达系统,制备UreB322和UreB527表位与多肽载体Poly-Asp-Lys的多抗原肽(MAP)疫苗并确定其免疫原性和免疫保护性.方法 采用连接引物PCR构建含肠激酶(EK)位点的串联式UreB322和UreB527表位基因及其原核表达系统.表达的目的重组融合蛋白8×rEK-UreB322-EK-UreB527-EK]经EK水解后用Sephadex G-25柱分离rUreB322-EK和rUreB527-EK片段.采用碳二亚胺法将rUreB322-EK、rUreB527-EK与Poly-Asp-Lys载体分子交联,制备出多抗原肽疫苗MAP-rUreB322/B527.采用ELISA和Western blot分别检测各重组表位肽及MAP-rUreB322/527的抗原性和免疫反应性.采用幽门螺杆菌SS1株感染BALB/c小鼠模型检测MAP-rUreB322/527免疫保护效果.结果 获得了8次重复串联的UreB322和UreB527编码基因及其原核表达系统,目的融合蛋白8×rEKUreB322-EK-rUreB527-EK]表达量可达细菌总蛋白的48％.肠激酶可将目的融合蛋白完全水解为rUreB322-EK和rUreB527-EK片段.rUreB322-EK和rUreB527-EK与Poly-Asp-Lys交联率高达92.5％.幽门螺杆菌全菌抗体及rUreB-IgG均能识别rUreB322-EK、rUreB527-EK和MAP-rUmB322/527并与之结合.MAP-rUreB322/527免疫小鼠血清抗体水平明显高于rUreB(P＜0.05).50或100μgMAP-rUreB322/527对幽门螺杆菌SS1株感染小鼠的保护率(83.3％和91.7％)明显高于等量rUreB(41.7％和50.0％)(P＜0.05).结论 本研究成功地构建了幽门螺杆菌UreB抗原优势表位UreB322和UreB527重复串联式编码基因及其原核表达系统,基于UreB优势抗原表位的多抗原肽疫苗MAPrUreB322/527能显著提高免疫保护效果. |
| 关 键 词： | 幽门螺杆菌 尿素酶B亚单位基因 优势抗原表位 多抗原肽疫苗 免疫保护 |
Synthesis of multiple antigenic peptide vaccine based on predominant epitopes of Helicobacter pylori UreB protein and immunoprotection of the vaccine |
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| WANG Yan-fang , WANG Huan , ZHANG Hui , YAN Jie , RUAN Ping.Synthesis of multiple antigenic peptide vaccine based on predominant epitopes of Helicobacter pylori UreB protein and immunoprotection of the vaccine[J].Chinese Journal of Microbiology and Immunology,2012,32(3). | |
| Authors: | WANG Yan-fang WANG Huan ZHANG Hui YAN Jie RUAN Ping |
| Abstract: | |
| Keywords: | Helicobacter py/ori UreB Predominant antigenic epitopes Multiple antigenic peptide vaccine Immunoprotection |
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