| 小鼠GITRL基因腺病毒载体的构建与鉴定 |
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| 作者姓名： | Ma J Tian J Liu Y Liu QL Mao ZM Jiao ZJ Xu HX Wang SJ |
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| 作者单位： | 1. 江苏大学免疫学和免疫检验学系,江苏,镇江,212013
2. 江苏大学附属医院,江苏,镇江,212001 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目,江苏省卫生厅科研基金资助项目,江苏省教育厅自然科学基金资助项目,江苏大学"拔尖人才"工程项目 |
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| 摘 要： | 目的:构建重组腺病毒pAdEasy-GFP-GITRL,并测定病毒滴度。方法:从PIRES-GITRL载体上用BglⅡ和SalⅠ双酶切,回收目的基因GITRL,插入同样用BglⅡ和SalⅠ双酶切的穿梭质粒pAdtrack-CMV中,将线性化穿梭质粒骨架质粒pAdEasy-1共转染BJ5183菌,鉴定正确后,将重组腺病毒载体pAdEasy-GFP-GITRL转染HEK293细胞,以包装出完整腺病毒。TCID50法测定重组腺病毒滴度,Western blot法检测GITRL蛋白表达。结果:成功构建小鼠GITRL基因的重组腺病毒载体(pAdEasy-GFP-GITRL),经包装后获得高滴度表达GITRL基因的重组腺病毒,病毒滴度为2.0×109pfu/mL。Western blot结果显示重组病毒载体能表达GITRL蛋白。结论:重组腺病毒表达载体(pAdEasy-GFP-GITRL)的成功构建及重组腺病毒的获得为GITRL基因干预治疗奠定了基础。
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| 关 键 词： | 重组腺病毒 病毒滴度 |
Construction and identification of recombinant adenovirus vector pAdEasy-GFP-GITRL |
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| Ma J,Tian J,Liu Y,Liu QL,Mao ZM,Jiao ZJ,Xu HX,Wang SJ.Construction and identification of recombinant adenovirus vector pAdEasy-GFP-GITRL[J].Journal of Cellular and Molecular Immunology,2010,26(11):1075-1077. |
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| Authors: | Ma Jie Tian Jie Liu Yan Liu Qing-ling Mao Zhao-ming Jiao Zhi-jun Xu Hua-xi Wang Sheng-jun |
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| Institution: | Department of Immunology, School of Medical Science and Laboratory Medicine, Jiangsu University, Zhengjiang 212013, China. |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | GITRL |
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