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槲皮素诱导耐甲氨蝶呤骨肉瘤细胞系U2-OS/MTX300凋亡
引用本文:谢显彪,尹军强,贾强,王晋,邹昌业,王姚斐,黄纲,沈靖南.槲皮素诱导耐甲氨蝶呤骨肉瘤细胞系U2-OS/MTX300凋亡[J].中山大学学报(医学科学版),2011,32(3).
作者姓名:谢显彪  尹军强  贾强  王晋  邹昌业  王姚斐  黄纲  沈靖南
作者单位:1. 中山大学附属第一医院骨肿瘤科,广东广州,510080
2. 贵州省生物研究所,贵州贵阳,550009
摘    要: 【目的】 研究槲皮素对耐甲氨蝶呤骨肉瘤细胞株U2-OS/MTX300的增殖抑制和诱导凋亡作用及相关机制。【方法】 以不同浓度槲皮素及甲氨蝶呤处理U2-OS及U2-OS/MTX300。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法及平板克隆检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期,Hochest 33258 染色及流式细胞仪检测凋亡,Western blot法检测凋亡相关蛋白cleaved-PARP,Bax,Bak,Bcl-2及Bcl-XL表达。【结果】 槲皮素可明显抑制耐甲氨蝶呤骨肉瘤细胞U2-OS/MTX300的增殖,72 h IC50值为(22 ± 4)μmol/L、10、25、50μmol/L可显著抑制U2-OS/MTX300克隆形成数量,且随剂量增加抑制作用明显增强。槲皮素与甲氨蝶呤之间不存在交叉耐药性。槲皮素能诱导U2-OS/MTX300细胞S期阻滞,并可诱导胞内产生典型凋亡小体,流式细胞仪可检测到明显凋亡。其作用机制是通过上调Bax,Bak及下调Bcl-2表达,促进cytochrome C释放及诱发PARP等重要胞内蛋白断裂来实现。【结论】 槲皮素可显著抑制耐甲氨蝶呤骨肉瘤细胞系U2-OS/MTX300细胞增殖并诱导其凋亡,线粒体途径可能是其诱导凋亡的重要机制。

关 键 词:槲皮素  骨肉瘤  细胞系  细胞凋亡  甲氨蝶呤
收稿时间:2011-02-14;

Quercetin Induces Apoptosis in Methotrexate Resistant Osteosarcoma Cell Line U2-OS/MTX300 In Vitro
XIE Xian-biao,YIN Jun-qiang,JIA Qiang,WANG Jin,ZOU Chang-ye,WANG Yao-fei,HUANG Gang,SHEN Jing-nan.Quercetin Induces Apoptosis in Methotrexate Resistant Osteosarcoma Cell Line U2-OS/MTX300 In Vitro[J].Journal of Sun Yatsen University(Medical Sciences),2011,32(3).
Authors:XIE Xian-biao  YIN Jun-qiang  JIA Qiang  WANG Jin  ZOU Chang-ye  WANG Yao-fei  HUANG Gang  SHEN Jing-nan
Institution:XIE Xian-biao1,YIN Jun-qiang1,JIA Qiang2,WANG Jin1,ZOU Chang-ye1,WANG Yao-fei1,HUANG Gang1,SHEN Jing-nan1(1.Department of Orthopaedic Oncology,The First Affiliated Hospital,Sun Yat-sen University,Guangzhou 510080,China,2.Institute of Biology,Guizhou Academy of Sciences,Guiyang 550009,China)
Abstract:Objective]To study the growth inhibition,apoptosis induction effects and underlying mechanism of quercetin on methotrexate resistant osteosarcoma cell line U2-OS/MTX300 in vitro.Methods] U2-OS and U2-OS/MTX 300 cells were treated with quercetin and methotrexate.Cell viability was evaluated by MTT and colony formation assay.Cell-cycle status,apoptosis inducing effect,and the expression of apoptosis-related proteins were evaluated by flow cytometry,fluorescent staining,DNA fragmentation assay,and Western bl...
Keywords:quercetin  osteosarcoma  cell line  apoptosis  methotrexate  
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