阴沟肠杆菌ampD基因突变与其AmpC酶持续高产关系的研究

目的 探讨阴沟肠杆菌ampD基因突变对持续高产型AmpCβ-内酰胺酶(AmpC酶)的调控机制,为临床有效控制产持续高产型AmpC酶细菌引起的感染提供理论依据.方法 收集分离自临床的阴沟肠杆菌,用改良的头孢西丁三维试验筛选产持续高产型AmpC酶的菌株,运用T载体和pMW219质粒分别对ampD基因进行测序比对,分析并验证其基因突变是否与AmpC酶高产有关.结果 127株阴沟肠杆菌中有4株为持续高产型AmpC酶阳性,阳性率为3.15％；4株阳性菌株中,E290菌株ampD基因扩增未见条带；E101与E539氨基酸序列一致,将其氨基酸序列与野生株进行比对,95.00％一致,有8个位点发生突变,63位由Phe→Tyr、71位由Ala→Arg、72位由Leu→Val、75位由Asp→ His、95位Trp→ Arg、131位Glu→Gln、141位Ile→ Val、143位Arg→Leu；E487为180个氨基酸,与野生型ampD氨基酸187个氨基酸的序列相比,78.00％一致,有40个位点不一致；重组子的表型检测结果显示,4株菌重组后对头孢替坦、头孢他啶、头孢曲松和氨曲南的MIC出现8～64倍的降低.结论 4株阳性菌中3株产生持续高产型AmpC酶与ampD基因突变有关,使其对β-内酰胺类药物MIC明显升高；新发现的突变位点数目多且分散,其中72、75、71、131和143位氨基酸,研究的意义较大.

Relationship between mutant ampD genes and overexpression of AmpC in Enterobacter cloacae