| 应用RNA干扰抑制乙肝病毒X基因促HepG2细胞凋亡的作用 |
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| 引用本文： | 范宝峰,刘晓梅,甘宜敏,史震,汤仁仙,郑葵阳.应用RNA干扰抑制乙肝病毒X基因促HepG2细胞凋亡的作用[J].中国免疫学杂志,2009,25(8). |
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| 作者姓名： | 范宝峰 刘晓梅 甘宜敏 史震 汤仁仙 郑葵阳 |
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| 作者单位： | 徐州医学院病原生物与免疫教研室,徐州,221002 |
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| 基金项目： | 江苏省高校自然科学基金 |
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| 摘 要： | 目的:构建靶向乙肝病毒X基因(HBX)的shRNA表达载体pSilencer3.1-shHBX,并应用其体外抑制HBX促HepG2细胞凋亡的作用.方法:设计并构建靶向HBX的shRNA表达载体pSilencer3.1-shHBX,脂质体转染法将HBX表达载体pcDNA3.1-HBX与pSilencer3.1-shHBX共转染人肝癌HepG2细胞,培养72小时后,分别以RT-PCR、Western blot和免疫荧光检测HBX的表达量.Annexin V-FITC/PI双染经流式细胞仪检测细胞的凋亡变化.结果:重组质粒pSilencer3.1-shHBX酶切鉴定和测序结果均与设计的一致.该质粒使HBX基因mRNA表达量降低了47.1%,进而使HBx蛋白表达量降低了58.9%,HBx蛋白荧光强度减弱,并使HBX 诱导的HepG2细胞凋亡率降低了52.11%.而阴性对照质粒无此作用.结论:成功构建靶向HBX shRNA表达载体pSilencer3.1-shHBX,并可应用其抑制HBX促HepG2细胞凋亡的作用.
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| 关 键 词： | RNA干扰 凋亡 |
Suppression of hepatitis B virus X gene induces apoptosis in HepG2 cells by RNA interference |
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| FAN Bao-Feng,LIU Xiao-Mei,GAN Yi-Min,SHI Zhen,TANG Ren-Xian,ZHENG Kui-Yang.Suppression of hepatitis B virus X gene induces apoptosis in HepG2 cells by RNA interference[J].Chinese Journal of Immunology,2009,25(8). |
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| Authors: | FAN Bao-Feng LIU Xiao-Mei GAN Yi-Min SHI Zhen TANG Ren-Xian ZHENG Kui-Yang |
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| Keywords: | HBX HepG2 |
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