摘 要: | 目的优化罗氏海盘车中抗炎成分总皂苷的提取纯化工艺,为罗氏海盘车抗炎药效物质基础及作用机制研究奠定基础。方法采用正交试验设计法,以总皂苷含量和出膏率的综合评分为考察指标,优化罗氏海盘车总皂苷提取工艺参数;采用大孔吸附树脂法,以总皂苷含量为考察指标,通过静、动态吸附与解吸实验优化罗氏海盘车总皂苷纯化工艺参数;采用噻唑蓝(MTT)法比较纯化前后提取物对脂多糖(LPS)诱导RAW264.7细胞的抑制作用。结果罗氏海盘车最佳提取条件为10倍量80%乙醇,回流提取3次,每次1 h;最佳纯化条件为采用NKA-9型号树脂,以浓度为0.4 g生药/m L的药液,按0.5 g·m L~(-1)(生药量/树脂体积)比例上样,3 BV水除杂后,4 BV 90%乙醇洗脱,石油醚脱脂,水饱和正丁醇萃取,纯化后样品纯度为75.44%,收率为1.43%;二次纯化物抗炎IC_(50)值比粗提物IC_(50)值降低63%。结论按此优化工艺,可获得纯度较高的罗氏海盘车皂苷类成分。
|