| FAAP的原核表达、纯化与抗体制备 |
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| 引用本文： | 刘新发,李镇安,王行明,郭海峰,郭红山,王丽,丁乃峥. FAAP的原核表达、纯化与抗体制备[J]. 中国现代医学杂志, 2011, 21(25) |
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| 作者姓名： | 刘新发 李镇安 王行明 郭海峰 郭红山 王丽 丁乃峥 |
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| 作者单位： | 中南大学生物科学与技术学院生物实验室,湖南长沙,410013 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金面上项目(No:30400039); 青年项目(No:30800088); 全国大学生创新性课题项目(No:YA09048) |
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| 摘 要： | 目的 构建pET28a-FAAP-His原核表达载体,表达His-FAAP融合蛋白,制备FAAP蛋白的多克隆抗体.方法 构建pET28a-FAAP-His原核表达载体,转化到大肠杆菌BL21中并诱导表达His-FAAP融合蛋白,用纯化的FAAP蛋白免疫昆明小白鼠后,制备多克隆抗体,通过Western blotting检验抗血清的特异性和灵敏性.结果 成功构建pET28a-FAAP-His原核表达栽体.在大肠杆菌BL21中经1mM的异丙基-β -D-硫代半乳糖苷(isopropy-β -D-thiogalactoside,IPTG)37℃诱导4h后,融合蛋白有很高水平的表达.Western blotting结果显示FAAP抗体能够有效地检测人血管内皮脐静脉细胞内FAAP蛋白的表达.结论 成功地对FAAP进行了原核表达、纯化,抗FAAP小鼠的多克隆抗体具有较好的特异性,为进一步研究FAAP的结构与功能奠定了坚实的基础.
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| 关 键 词： | 小鼠FAAP基因 原核表达 蛋白纯化,western blotting 多克隆抗体 |
Expression,purification and antibody preparation of FAAP |
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| LIU Xin-fa,LI Zhen-an,WANG Xing-ming,GUO Hai-feng,GUO Hong-shan,WANG Li,DING Nai-zheng. Expression,purification and antibody preparation of FAAP[J]. China Journal of Modern Medicine, 2011, 21(25) |
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| Authors: | LIU Xin-fa LI Zhen-an WANG Xing-ming GUO Hai-feng GUO Hong-shan WANG Li DING Nai-zheng |
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| Affiliation: | LIU Xin-fa,LI Zhen-an,WANG Xing-ming,GUO Hai-feng,GUO Hong-shan,WANG Li,DING Nai-zheng(Biological laboratory,School of Biological Science and Technology,Central South University,Changsha 410013,P.R.China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | mouse FAAP gene prokaryotic expression protein purification western blotting polyclonal antibody |
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