| 抗G418小鼠胚胎干细胞饲养层的制备 |
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| 引用本文： | 张梅英,李华,董婉维,杨葳,汪瑛,秦英,王禄增,王太一.抗G418小鼠胚胎干细胞饲养层的制备[J].中国医科大学学报,2005,34(1):1-3. |
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| 作者姓名： | 张梅英 李华 董婉维 杨葳 汪瑛 秦英 王禄增 王太一 |
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| 作者单位： | 中国医科大学实验动物部,辽宁,沈阳,110001 |
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| 摘 要： | 目的:建立具有G418抗性的3T3细胞系,用于转染pTet-on基因的ES阳性克隆筛选的饲养层.方法:通过脂质体转染的方法,将含有neo基因的质粒pWL/neo导入3T3细胞中,利用G418的药物选择特性,对转染细胞进行压力筛选,并对其进行PCR鉴定.结果:经500μg/ml的G418压力筛选后,获得了抗G418细胞克隆.抗性3T3细胞的形态和生长速度与正常3T3细胞没有差异,用特异性核苷酸引物检测抗性细胞基因组DNA,可以扩增出对应的核苷酸片段,Southern blot鉴定结果表明neo基因片段已整合入G418抗生3T3细胞中.结论:成功地培育了G418抗性的3T3细胞,为进行pTet-on基因转染ES细胞的阳性细胞克隆筛选奠定了基础.
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| 关 键 词： | 3T3细胞 G418抗性 饲养层 胚胎干细胞 |
| 文章编号： | 0258-4646(2005)01-0001-03 |
| 修稿时间： | 2003年12月11 |
Development of a G418-resistant feeder layer of embryonic stem cell of mice |
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| ZHANG Mei-ying,LI Hua,DONG Wan-wei,YANG Wei,WANG Ying,QIN Ying,WANG Lu-zeng,WANG Tai-yi.Development of a G418-resistant feeder layer of embryonic stem cell of mice[J].Journal of China Medical University,2005,34(1):1-3. |
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| Authors: | ZHANG Mei-ying LI Hua DONG Wan-wei YANG Wei WANG Ying QIN Ying WANG Lu-zeng WANG Tai-yi |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | T3 cell G418 resistance feeder layer embryonic stem cell |
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