| FGL2基因RNAi慢病毒载体的构建及外源性筛选与鉴定 |
| |
| 引用本文： | 王慧方,郑振中.FGL2基因RNAi慢病毒载体的构建及外源性筛选与鉴定[J].安徽医科大学学报,2012,47(10):1165-1168. |
| |
| 作者姓名： | 王慧方 郑振中 |
| |
| 作者单位： | 南昌大学第一附属医院心血管内科,南昌,330000;南昌大学第一附属医院心血管内科,南昌,330000 |
| |
| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目,江西省科技支撑计划项目 |
| |
| 摘 要： | 目的拟构建人纤维蛋白原样蛋白2(FGL2)凝血酶原酶基因RNA干扰慢病毒载体,为调控人FGL2凝血酶原酶表达水平提供有利的工具。方法根据人FGL2凝血酶原酶基因的mRNA序列选择4条靶序列,设计合成靶序列的Oligo DNA,退火形成双链DNA,与经AgeⅠ和EcoRⅠ双酶切后的pGCSIL-GFP载体连接产生FGL2慢病毒载体,采用PCR及测序鉴定,应用Western blot技术外源性筛选干扰效率高的有效靶序列。用慢病毒包装系统pGCSIL-GFP、pHelper1.0和pHelper2.0共转染包装293T细胞,包装产生慢病毒,以系列稀释法测定病毒滴度。结果 PCR扩增和测序结果显示,人FGL2凝血酶原酶核苷酸链序列插入正确,外源性筛选确定一条干扰效率高的有效靶序列。利用筛选确定的有效靶序列,包装产生慢病毒,其浓缩病毒悬液的滴度为1×109TU/ml。结论证实实验成功构建了FGL2基因RNA干扰慢病毒载体。
|
| 关 键 词： | 慢病毒载体 RNA干扰 FGL2基因 |
Construction,exogenous selection and identification of lentiviral vector targeting human fibrinogen-like protein 2 gene |
| |
| Wang Huifang,Zheng Zhenzhong.Construction,exogenous selection and identification of lentiviral vector targeting human fibrinogen-like protein 2 gene[J].Acta Universitis Medicinalis Anhui,2012,47(10):1165-1168. |
| |
| Authors: | Wang Huifang Zheng Zhenzhong |
| |
| Institution: | (Dept of Cardiology,The First Affiliated Hospital of Nanchang University,Nanchang 330000) |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ |
|
