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| 骨髓间充质干细胞中大鼠白细胞介素10复制缺陷型重组腺病毒的表达 | |
| 引用本文： | 李爽,毕良宽,朱斌,唐冰,朱家源. 骨髓间充质干细胞中大鼠白细胞介素10复制缺陷型重组腺病毒的表达[J]. 中国组织工程研究与临床康复, 2012, 16(27): 5028-5033 |
| 作者姓名： | 李爽 毕良宽 朱斌 唐冰 朱家源 |
| 作者单位： | 1. 南方医科大学附属第三医院普通外科,广东省广州市,510630 2. 中山大学附属第二医院泌尿外科,广东省广州市,510120 3. 中山大学附属第一医院烧伤外科,广东省广州市,510080 |
| 摘 要： | 背景:研究显示,白细胞介素10在脓毒症等炎性疾病发挥了抑制炎症反应、促进疾病转归的重要作用。目的:构建大鼠白细胞介素10重组腺病毒,并以骨髓间充质干细胞为基因载体,观察外源基因在细胞中的表达情况。方法:采用反转录-聚合酶链反应方法从SD大鼠新鲜脾脏组织中提取出的总RNA中克隆大鼠白细胞介素10基因,通过AdEasy系统成功包装、扩增并纯化出含目的基因的重组腺病毒颗粒。取大鼠骨髓细胞,利用密度梯度离心法和贴壁法分离并扩增骨髓间充质干细胞,并使用流式细胞仪进行表型鉴定。以不同感染倍数的Ad.rIL-10/Ad.GFP感染骨髓间充质干细胞,在荧光显微镜下观察感染效率,并用反转录-聚合酶链反应和Weaternblot方法检测目的基因在大鼠骨髓间充质干细胞中的表达。结果与结论:成功构建了重组腺病毒Ad.rIL-10,计算病毒滴度为6.0×1010pfu/mL。重组腺病毒Ad.rIL-10对骨髓间充质干细胞有较高的转染效率,当感染复数=200时为70%。提示含外源基因大鼠白细胞介素10的骨髓间充质干细胞持续高效地表达目的基因,是基因治疗的良好细胞载体。 |
| 关 键 词： | 白细胞介素10 腺病毒载体 骨髓间充质干细胞 目的基因 脓毒症 |
Expression of replication-deficient adenovirus expressing rat interleukin-10 in bone marrow mesenchymal stem cells |
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| Li Shuang , Bi Liang-kuan , Zhu Bin , Tang Bing , Zhu Jia-yuan. Expression of replication-deficient adenovirus expressing rat interleukin-10 in bone marrow mesenchymal stem cells[J]. Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research, 2012, 16(27): 5028-5033 | |
| Authors: | Li Shuang Bi Liang-kuan Zhu Bin Tang Bing Zhu Jia-yuan |
| Affiliation: | 1 Department of General Surgery,Third Affiliated Hospital of Southern Medical University,Guangzhou 510630,Guangdong Province,China;2 Department of Urinary Surgery,Second Affiliated Hospital of Sun Yat-sen University,Guangzhou 510120,Guangdong Province,China;3 Department of Burns,First Affiliated Hospital of Sun Yat-sen University,Guangzhou 510080,Guangdong Province,China |
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