摘 要: | 目的:从日本血吸虫虫卵文库中筛选并鉴定出与免疫诊断及免疫预防有关的基因克隆。方法:采用S.jSEA超免疫兔血清对日本血吸虫卵文库进行筛选。先去除抗大肠杆菌抗体,经三轮筛选得到12个阳性克隆,然后,用辅助噬菌体进行体内剪切,经抗菌素平板筛选含重组质粒的阳性菌落,每个菌落分为2份,一份进行PCR扩增以测定插入片段的大小。另一份用于制备纯质粒DNA模板,进行DNA序列测定,通过GCG软件对所得DNA序列与GenBank中的序列进行同源性比较。结果:共筛得12个阳性克隆,PCR后测得其长度大多为1.2kb,其中8个与S.j热休克蛋白70的基因同源,2个与S.j钙网蛋白同源,1个与S.mimmunophilin同源,1个与S.j23kDa蛋白同源。结论:本研究首次报道用抗SEA血清对日本血吸虫虫卵文库的筛选结果,所得的12个阳性克隆均为编码日本血吸虫免疫诊断及预防有关的基因。
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