黄芩苷对离体心脏缺血再灌注损伤的保护效应

目的：观察中药黄芩苷对离体状态下缺血再灌注损伤心脏的保护效应。方法：实验于2005-09／12在锦州医学院药理学教研室完成。选用雄性成年SD大鼠60只，头部击昏后迅速取出心脏，采用离体大鼠心脏Langendorff灌流模型制备离体心脏缺血再灌注损伤模型。随机数字表法分为5组．每组12只。①对照组：以含氧K-H液灌注100min。②再灌注组：在对照组基础上灌注含氧K-H液10min后，停止灌流30min，然后再灌注60min。③黄芩苷60μmol／L再灌注组：灌注方法同再灌注组，再灌注时加入60μmol／L黄芩苷溶液。④黄芩苷120μmol／L再灌注组：再灌注时加入120μmol／L黄芩苷溶液。⑤黄芩苷240μmol／L再灌注组：再灌注时加入240μmol／L黄芩苷溶液。应用黄嘌呤测定法测定超氧化物歧化酶活性；应用TAB比色原理测定心肌组织中脂质过氧化产物丙二醛含量；收集各组冠脉流出液测定肌酸激酶、乳酸脱氢酶活性，用以评价心肌细胞受损程度及黄芩苷的保护作用。原位末端标记法标记后应用流式细胞仪进行细胞凋亡率测定，进一步从DNA水平观察细胞受损程度及黄芩苷的保护作用。计量资料差异比较采用t检验，组间数据处理采用方差齐性分析，采用非配对t检验。结果：在实验过程中无动物死亡，全部进入结果分析。①大鼠心肌组织超氧化物歧化酶活性：再灌注组较对照组明显下降[（7301&;#177;350），（3400&;#177;600）nkat／g，P〈0.05]；黄芩苷60，120，240μmol／L再灌注组较再灌注组有不同程度增加且随浓度增加作用增强[（5251&;#177;717），（5917&;#177;172），（6818&;#177;633），（3400&;#177;600）nkat／g，P〈0．05]。②丙二醛含量：再灌注组较正常组增加[（85&;#177;17），（275&;#177;20）nmol／g，P〈0．05]，黄芩苷60，120，240μmol／L再灌注组较再灌注组有不同程度下降且呈剂量依赖性[（189&;#177;32），（126&;#177;27），（97&;#177;19），（275&;#177;20）nmol／g，P〈0．05]。③冠脉流出液中肌酸激酶活性活性变化：再灌注组较正常组增加[（80．28&;#177;17．12），（105．43&;#177;3．95）mkat／L，P〈0．05]，黄芩苷60，120，240μmol／L再灌注组较再灌注组降低且有剂量依赖性[（90．86&;#177;9．13），（86．90&;#177;5．68），（84．40&;#177;19．15），（105．43&;#177;3．95）mkat／L，P〈0．05]。④冠脉流出液中乳酸脱氢酶活性：再灌注组较正常组增加[（47．24&;#177;4．56），（68．59&;#177;11．74）mkat／L，P〈0．05]，黄芩苷60，120，240μmol／L再灌注组较再灌注组降低且有剂量依赖性[（50．45&;#177;5．37），（49．94&;#177;4．861，（47．57&;#177;4．58），（68．59&;#177;11．74）mkat／L．P〈0．05]。⑤大鼠心肌细胞凋亡率：再灌注组较对照组凋亡率明显增加（10．58％，23．73％，P〈0．05），黄芩苷60，120，240μmol／L再灌注组比再灌注组降低且呈剂量依赖性（9．35％，15．69％，10．41％，23．73％，P〈0．05）。结论：黄芩苷可改善心肌缺血再灌注损伤所致乳酸脱氢酶、肌酸激酶释放量增加及心肌超氧化物歧化酶生成量的降低，降低乳酸脱氢酶、肌酸激酶、丙二醛释放量，增高超氧化物歧化酶活性；减少心肌细胞凋亡率。黄芩苷对离体心脏缺血再灌注所致损伤及凋亡有保护作用，并呈现剂量依赖性。

Protective effect of baicalin against ischemic-reperfnsion injury of isolated hearts