| 表达增强型绿色荧光蛋白K562细胞株的建立及其检测自然杀伤细胞活性的效果评价 |
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| 引用本文： | 杨道锋,朱慧芬,梁智辉,刘红云,刁智娟,刘静,沈关心.表达增强型绿色荧光蛋白K562细胞株的建立及其检测自然杀伤细胞活性的效果评价[J].中华检验医学杂志,2006,29(6):550-553. |
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| 作者姓名： | 杨道锋 朱慧芬 梁智辉 刘红云 刁智娟 刘静 沈关心 |
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| 作者单位： | 1. 430030,武汉,华中科技大学同济医学院附属同济医院感染科
2. 430030,武汉,华中科技大学同济医学院附属同济医院免疫学系 |
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| 摘 要： | 目的建立一种准确、稳定的自然杀伤细胞(NK)活性检测方法。方法通过电穿孔法将含增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的质粒转入K562细胞,经G418筛选后进行克隆,获得EGFP阳性表达细胞株;采用流式细胞仪和乳酸脱氢酶法检测10名健康人外周血NK细胞活性。结果通过基因转染的方法得到1株稳定表达EGFP的K562细胞,转染EGFP对细胞生长无影响,10名健康人外周血NK细胞对转染EGFP的细胞及未转染细胞的杀伤活性无差异(P>0.05);表达EGFP的K562细胞在效靶比为40∶1时,用流式细胞仪检测培养2和4h时的NK细胞杀伤率分别为(21.5±1.3)%和(23.7±1.5)%,二者无差异(P>0.05);而用乳酸脱氢酶法测定培养4h的NK细胞对K562和EGFP-K562的杀伤率分别为(23.6±2.3)%和(23.7±2.3)%]均高于2h的杀伤率(18.0±1.1)%和(18.2±1.3)%,P<0.05]。结论成功建立了表达EGFP的K562细胞株,将该细胞株作为靶细胞用于流式细胞术检测NK细胞活性时,无需预先染色和标记靶细胞,且操作简便、省时、稳定、可靠。
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| 关 键 词： | 杀伤细胞 流式细胞术 增强型绿色荧光蛋白 |
| 收稿时间： | 2005-11-01 |
| 修稿时间： | 2005年11月1日 |
Establishment of EGFP-K562 stable cell line and its application in measurement of natural killer cell cytotoxicity by flow cytometry |
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| YANG Dao-feng,ZHU Hui-fen,HANG Zhi-hui,LIU Hong-yun,DIAO Zhi-juan,LIU Jing,SHEN Guan-xin.Establishment of EGFP-K562 stable cell line and its application in measurement of natural killer cell cytotoxicity by flow cytometry[J].Chinese Journal of Laboratory Medicine,2006,29(6):550-553. |
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| Authors: | YANG Dao-feng ZHU Hui-fen HANG Zhi-hui LIU Hong-yun DIAO Zhi-juan LIU Jing SHEN Guan-xin |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Killer cell Flow cytometry Enhanced green fluorescent protein |
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