胰岛素样生长因子1作用下的骨髓间充质干细胞对大鼠肺纤维化的治疗作用及其机制

目的通过观察胰岛素样生长因子1（IGF-1）作用过的骨髓间充质干细胞（BMSC）对博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化模型的影响,探讨治疗肺纤维化的新方法。方法体外分离、培养雄性6周龄SD大鼠的BMSC。将48只雄性成年SD大鼠随机分为四组：阴性对照组（N组）、博莱霉素组（B组）、间充质干细胞组（M组）及IGF-1处理组（I组）。N组经气管注入1 mL生理盐水,B、M及I组均经气管注入1 mL博莱霉素（5 mg/kg）。在造模2 d后,B组大鼠经尾静脉注入生理盐水0.5 mL,M组大鼠经尾静脉注入CM-D il标记的BMSC 0.5 mL（细胞数2×106）,I组注入经IGF-1培育48 h的相同数量的标记BMSC。在造模第7、14及28 d批量处死各组大鼠,留取肺组织行HE、Masson染色评价肺组织病理变化,冰冻切片观察肺组织内细胞定植情况,消化法测定肺组织羟脯氨酸（HYP）含量,RT-PCR方法检测各组大鼠肺组织肝细胞生长因子（HGF）mRNA的表达。结果 M组和I组肺组织在显微镜下可见红色荧光标记的BMSC,I组不同时间点的累积光密度值均高于M组（P〈0.05）,且M组和I组的荧光在28 d时均有所衰减。M组和I组的炎症在实验早期便轻于B组（P〈0.05）,其中I组更明显（P〈0.05）,至28 d时M组和I组炎症评分与N组的差异无统计学意义。B组、M组和I组肺纤维化评分在博莱霉素注入14 d时均明显高于N组（P〈0.05）,28 d时M组和I组的肺纤维化程度轻于B组（P〈0.05）,但M组与I组之间的差异始终无统计学意义。B组HYP含量在整个实验阶段均高于其他三组（P〈0.01）,而I组HYP含量始终与N组无显著差异;M组HYP含量在早期大于I组和N组,至28 d降至与N组间无显著差异。N组和B组的HGF mRNA表达一直保持在较低水平,M组和I组HGF mRNA的表达水平在第7 d时无显著差异,均高于N组和B组（P〈0.01）,至第14 d时I组开始高于M组（P〈0.05）,28 d时差异更明显（P〈0.01）。结论 IGF-1可以促进BMSC异体定植从而对肺损伤进行更有效的修复,机制可能是其促进了BMSC分泌HGF。

The Effects and Related Mechanism of IGF-1-Treated Mesenchymal Stem Cells in Pulmonary Fibrosis in Rats

Objective To explore the new therapy for pulmonary fibrosis by observing the effects of insulin-like growth factor 1(IGF-1) treated mesenchymal stem cells(MSCs) in rats with bleomycin-induced pulmonary fibrosis. Methods Bone marrow mesenchymal stem cells(BMSCs) were harvested from 6-week old male SD rats and cultured in vitro for the experiment.48 SD rats were randomly divided into 4 groups,ie.a negative control group(N),a positive control group/bleomycin group(B),a MSCs grafting group(M),and an IGF-1 treat...