| 表达结核杆菌ESAT-6基因重组耻垢分枝杆菌的构建及其功能研究 |
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| 引用本文： | 李岩,鲍朗,张会东,李娅莎,朱海龙. 表达结核杆菌ESAT-6基因重组耻垢分枝杆菌的构建及其功能研究[J]. 南方医科大学学报, 2006, 26(7): 923-926 |
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| 作者姓名： | 李岩 鲍朗 张会东 李娅莎 朱海龙 |
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| 作者单位： | 四川大学华西医学中心基础与法医学院感染免疫研究室,四川,成都,610041;四川大学华西医学中心基础与法医学院感染免疫研究室,四川,成都,610041;四川大学华西医学中心基础与法医学院感染免疫研究室,四川,成都,610041;四川大学华西医学中心基础与法医学院感染免疫研究室,四川,成都,610041;四川大学华西医学中心基础与法医学院感染免疫研究室,四川,成都,610041 |
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| 摘 要： | 目的构建表达结核分枝杆菌ESAT-6基因的重组耻垢分枝杆菌并对其免疫功能进行研究。方法采用PCR技术克隆结核分枝杆菌ESAT-6基因，构建大肠杆菌一分枝杆菌穿梭表达质粒pMV—ESAT6．经酶切分析和DNA测序证实连接片断的正确性后．用电穿孔法将重组质粒转染到耻垢分枝杆菌mc^2155中。以SDS-PAGE检测ESAT-6蛋白在重组耻垢分枝杆菌中的表达。以重组耻垢分枝杆菌感染小鼠巨噬细胞ANA-1，半定量RT—PCR检测ANA-1细胞诱导型一氧化氮合酶（iNOS）表达水平，裂解巨噬细胞，计数胞内存活细菌数。结果重组耻垢分枝杆菌构建成功，经热诱导后可以表达相对分子质量约为6000的蛋白，与预期值一致。重组耻垢分枝杆菌能够诱导ANA-1细胞活化表达iNOS，并增强巨噬细胞的杀伤活性，重组耻垢分枝杆菌在胞内存活数低于对照组（P〈0．05）。结论表达结核分枝杆菌ESAT-6基因的重组耻垢分枝杆菌具有免疫原性，为构建新型结核疫苗提供了实验基础。
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| 关 键 词： | ESAT-6 大肠杆菌-分枝杆菌穿梭质粒 重组耻垢分枝杆菌 巨噬细胞 |
| 文章编号： | 1673-4254（2006）07-0923-04 |
| 收稿时间： | 2005-08-07 |
| 修稿时间： | 2005-08-07 |
Construction of recombinant Mycobacterium smegmatis expressing ESAT-6 and its effects on macrophages |
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| LI Yan,BAO Lang,ZHANG Hui-dong,LI Ya-sha,ZHU Hai-long. Construction of recombinant Mycobacterium smegmatis expressing ESAT-6 and its effects on macrophages[J]. Journal of Southern Medical University, 2006, 26(7): 923-926 |
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| Authors: | LI Yan BAO Lang ZHANG Hui-dong LI Ya-sha ZHU Hai-long |
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| Affiliation: | Laboratory of Infection and Immunity, College of Preclinical and Forensic Medicine, West China Medical Center of Sichuan University, Chengdu 610041, China. ly506@163.com |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | ESAT-6 |
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