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| TLR4基因的shRNA对内毒素刺激下RAW264.7细胞TLR2表达的影响及机制 | |
| 引用本文： | 徐建波,吴河水,张进祥,王琳,陈凤花,王春友.TLR4基因的shRNA对内毒素刺激下RAW264.7细胞TLR2表达的影响及机制[J].中华急诊医学杂志,2008,17(3). |
| 作者姓名： | 徐建波 吴河水 张进祥 王琳 陈凤花 王春友 |
| 作者单位： | 1. 华中科技大学附属协和医院胰腺外科,武汉,430022 2. 华中科技大学附属协和医院急诊外科,武汉,430022 3. 华中科技大学附属协和医院儿科,武汉,430022 4. 华中科技大学附属协和医院检验科,武汉,430022 |
| 摘 要： | 目的 观察针对Toll样受体4的发夹结构RNA(short hairpin RNA,shRNA)对内毒素刺激后小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞Toll样受体2表达的影响,并探讨其机制.方法 将携带增强型绿色荧光蛋白(EGFP)及shRNA克隆位点的质粒pEGFP/TLR4-siRNA,运用脂质体Lipofectamine2000转染至小鼠巨噬细胞系RAW264.7.转染24 h后予新霉素(G418)筛选获取稳定转染细胞株.然后将细胞分为三组:空白组(Blank group),未转染细胞LPS刺激组(LPS group)和稳定转染细胞LPS刺激组(LPS-TLR4-siRNA group),采用荧光定量PCR及流式细胞学方法检测各组细胞TLR2 mRNA和蛋白的表达,Western blot检测NF-κB p65的表达,同时用ELISA方法检测细胞分泌的TNF-α水平的变化.结果 将pEGFP/TLR4-siRNA转染至RAW264.7细胞后,增强型荧光蛋白的表达为(45.25±9.23)%.LPS-TLR4-siRNA组细胞的TLR2mRNA及蛋白的表达均明显低于LPS组(P＜0.05),同时NF-κB p65表达下调及分泌TNF-α的水平下降(P＜0.01).结论 针对TLR4 mRNA的shRNA能降低LPS刺激下的RAW204.7细胞TLB2的表达. |
| 关 键 词： | RNA干扰 内毒素 巨噬细胞 Toll样受体 |
Effects of short hairpin RNA targeting TLR4 on TLR2 expression induced by lipopolysaccharide in murine macrophage cell line RAW 264.7 |
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| XU Jian-bo,WU He-shui,ZHANG Jin-xiang,WANG Lin,CHENG Feng-hua,WANG Chun-you.Effects of short hairpin RNA targeting TLR4 on TLR2 expression induced by lipopolysaccharide in murine macrophage cell line RAW 264.7[J].Chinese Journal of Emergency Medicine,2008,17(3). | |
| Authors: | XU Jian-bo WU He-shui ZHANG Jin-xiang WANG Lin CHENG Feng-hua WANG Chun-you |
| Abstract: | |
| Keywords: | |
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