| 晚期糖基化终末产物受体不同突变体真核表达载体的构建和表达 |
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| 引用本文： | 程蔚蔚,李煜生,龚小卫,赵琳琳,王继刚,邓鹏,姜勇.晚期糖基化终末产物受体不同突变体真核表达载体的构建和表达[J].南方医科大学学报,2008,28(10):1779. |
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| 作者姓名： | 程蔚蔚 李煜生 龚小卫 赵琳琳 王继刚 邓鹏 姜勇 |
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| 作者单位： | 南方医科大学病理生理学教研室和广东省蛋白质组学重点实验室,广东,广州,510515;南方医科大学病理生理学教研室和广东省蛋白质组学重点实验室,广东,广州,510515;南方医科大学病理生理学教研室和广东省蛋白质组学重点实验室,广东,广州,510515;南方医科大学病理生理学教研室和广东省蛋白质组学重点实验室,广东,广州,510515;南方医科大学病理生理学教研室和广东省蛋白质组学重点实验室,广东,广州,510515;南方医科大学病理生理学教研室和广东省蛋白质组学重点实验室,广东,广州,510515;南方医科大学病理生理学教研室和广东省蛋白质组学重点实验室,广东,广州,510515 |
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| 基金项目： | 教育部创新团队发展基金，国家自然科学基金委-广东省人民政府自然科学联名基金重点项目，广东省科技厅科技计划，广东省自然科学基金 |
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| 摘 要： | 目的 构建带HA标签的晚期糖基化终末产物受体(RAGE)不同突变体的真核细胞表达载体.方法 采用定点突变技术将亚克隆在载体pcDNA3-HA上的野生型RAGE构建成不同突变体pcDNA3-HA-RAGE(S391A)、pcDNA3-HA-RAGE(S399A)、pcDNA3-HA-RAGE(S400A)、pcDNA3-HA-RAGE(T401A),经测序鉴定正确后转染HEK293细胞,利用Western blotting检测各突变体的表达.结果 RAGE不同突变体经测序鉴定正确无误后.在HEK293细胞中得到高量表达.结论 成功构建了RAGE不同突变体的真核表达载体,并在真核细胞中进行了表达,为进一步研究RAGE在细胞信号转导中的作用奠定了基础.
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| 关 键 词： | 晚期糖基化终末产物受体 定点突变 载体构建 基因表达 |
Construction of different mutants of HA-tagged human RAGE gene and their eukaryotic expression |
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| CHENG Wei-wei,LI Yu-sheng,GONG Xiao-wei,ZHAO Lin-lin,WANG Ji-gang,DENG Peng,JIANG Yong.Construction of different mutants of HA-tagged human RAGE gene and their eukaryotic expression[J].Journal of Southern Medical University,2008,28(10):1779. |
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| Authors: | CHENG Wei-wei LI Yu-sheng GONG Xiao-wei ZHAO Lin-lin WANG Ji-gang DENG Peng JIANG Yong |
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| Institution: | CHENG Wei-wei,LI Yu-sheng,GONG Xiao-wei,ZHAO Lin-lin,WANG Ji-gang,DENG Peng,JIANG Yong Department of Pathophysiology , Key Laboratory of Proteomics of Guangdong Province,Southern Medical University,Guangzhou 510515,China |
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| Abstract: | Objective To construct eukaryotic expression vectors for HA-tagged receptor for advanced glycation end products(RAGE) mutants.Methods Site-directed mutagenesis was applied to wild-type RAGE gene cloned in the pcDNA3 vector with HA tag to obtain the mutants pcDNA3-HA-RAGE(S391A), pcDNA3-HA-RAGE(S399A), pcDNA3-HA-RAGE(S400A), and pcDNA3-HA-RAGE(T401A).After identification by sequencing, the mutants were transfected into HEK293 cells, and the expression of these mutants were detected by Western blotting using ... |
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| Keywords: | receptor advanced glycation end products site-directed mutagenesis vector construction gene expression |
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