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| 靶向肿瘤干细胞标记CD133特异性结合肽的筛选和初步鉴定 | |
| 引用本文： | 田平阁,周春平,张超,杨慧,吴小金,陆滟霞,刘国炳,李学农.靶向肿瘤干细胞标记CD133特异性结合肽的筛选和初步鉴定[J].南方医科大学学报,2011,31(5):761-766. |
| 作者姓名： | 田平阁 周春平 张超 杨慧 吴小金 陆滟霞 刘国炳 李学农 |
| 作者单位： | 田平阁,周春平,张超,杨慧,吴小金,陆滟霞,李学农,TIAN Ping-ge,ZHOU Chun-ping,ZHANG Chao,YANG Hui,WU Xiao-jin,LU Yan-xia,LI Xue-nong(南方医科大学基础医学院病理学系,广东省分子肿瘤病理学重点实验室,广东,广州,510515);刘国炳,LIU Guo-bing(南方医科大学,南方医院妇产科,广东,广州,510515) |
| 基金项目： | 国家自然科学基金，广东省科技计划项目，广东省自然科学基金 |
| 摘 要： | 摘要：目的筛选可与人肿瘤干细胞表面标记物CD133特异性结合的短肽并进行初步鉴定。方法首先合成人肿瘤干细胞 表面标记物CD133 细胞外片段的生物素化蛋白，以此为靶，利用噬菌体肽库技术，高通量液相淘选CD133 的特异性短 肽。应用夹心EL ISA选择出结合较强的克隆。提取DNA测序，通过竞争性阻断实验验证其特异性，根据噬菌体基因序 列推导出多肽序列。通过免疫荧光技术初步验证合成多肽和人大肠癌细胞的结合情况。结果4 轮液相筛选后，与 CD133特异性结合的噬菌体得到有效富集，第4轮与第1轮相比，富集了388倍。经ELISA 鉴定的20个噬菌体单克隆中， 有13个与CD133有较高亲和力，具有阳性意义。经比对得到11条完全一致的氨基酸序列TISWPPR，2条完全一致的氨 基酸序列STTKLAL，竞争性阻断ELISA实验表明第一条特异性较强。结论成功利用噬菌体肽库技术，淘选出1条可和 人CD133特异性结合的高亲和力短肽，为后续CD133的研究奠定了基础，表明从噬菌体肽库中液相淘选生物素化小分子 的高亲和力多肽的方法切实可行。 |
| 关 键 词： | 肿瘤干细胞 CD133 噬菌体展示 肽库 |
Selection and identification of specific-binding peptides for cancer stem cell surface marker CD133 |
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| TIAN Ping-ge,ZHOU Chun-ping,ZHANG Chao,YANG Hui,WU Xiao-jin,LU Yan-xia,LIU Guo-bing,LI Xue-nong.Selection and identification of specific-binding peptides for cancer stem cell surface marker CD133[J].Journal of Southern Medical University,2011,31(5):761-766. | |
| Authors: | TIAN Ping-ge ZHOU Chun-ping ZHANG Chao YANG Hui WU Xiao-jin LU Yan-xia LIU Guo-bing LI Xue-nong |
| Institution: | TIAN Ping-ge1,ZHOU Chun-ping1,ZHANG Chao1,YANG Hui1,WU Xiao-jin1,LU Yan-xia1,LIU Guo-bing2,LI Xue-nong1 Department of Pathology,College of Basic Medical Sciences,Key Laboratory of Molecule Tumor Pathology of Guangdong Province,1Department of Obstetrics and Gynecology,Nanfang Hospital2,Southern Medical University,Guangzhou 510515,China |
| Abstract: | Objective To select the peptides that specifically bind human cancer stem cell surface marker CD133 from the Ph.D.-7TM phage peptide library.Methods With a biotinated extracellular fragment of human cancer stem cell surface marker CD133 as the target protein,the CD133 high-affinity peptides were screened from the phage peptide library by liquid phase panning.The clones with high-binding force with human CD133 were then identified by sandwich ELISA and their single-stranded DNA was extracted to test the spec... |
| Keywords: | CD133 |
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