| 裂谷热病毒TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 朱晓文,李林,桑晓宇,高玉伟,胡桂学,冯娜,王铁成,步志高,夏咸柱.裂谷热病毒TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立[J].中国人兽共患病杂志,2012,28(4). |
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| 作者姓名： | 朱晓文 李林 桑晓宇 高玉伟 胡桂学 冯娜 王铁成 步志高 夏咸柱 |
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| 作者单位： | 朱晓文 (中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所,吉林省人畜共患病预防与控制重点实验室,长春,130122) ； 李林 (吉林农业大学动物科技学院,长春,130118) ； 桑晓宇 (中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所,吉林省人畜共患病预防与控制重点实验室,长春,130122) ； 高玉伟 (吉林农业大学动物科技学院,长春,130118) ； 胡桂学 (中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所,吉林省人畜共患病预防与控制重点实验室,长春,130122) ； 冯娜 (中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,哈尔滨,150001) ； 王铁成 (中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所,吉林省人畜共患病预防与控制重点实验室,长春,130122) ； 步志高 (吉林农业大学动物科技学院,长春,130118) ； 夏咸柱 (中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所,吉林省人畜共患病预防与控制重点实验室,长春,130122) ； |
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| 摘 要： | 目的根据裂谷热病毒(Rift Valley Fever Virus,RVFV)M片段的保守序列设计并合成特异性引物和TaqMan探针,建立鉴定裂谷热病毒的TaqMan实时荧光定量PCR检测方法。方法合成裂谷热病毒M片段基因,PCR扩增后将其连入pMD18-T载体,构建重组质粒作为阳性标准品,以10倍系列稀释的标准品进行荧光定量PCR扩增,并绘制标准曲线。结果所绘制标准曲线的相关系数为0.999,该检测方法的灵敏度达40copies/μL,特异性好,对除裂谷热病毒外其他病毒(PPRV、HFV、RV、SPPV和GIPV)检测均为阴性。该方法重复性好,批内重复和批间重复的变异系数均小于1%。结论裂谷热病毒TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立为裂谷热病毒的快速准确诊断及流行病学调查提供了有效的手段。
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