I型单纯疱诊病毒胸苷激酶基因传染人卵巢瘤细胞株后联合抗肿瘤药物诱导该细

目的 用复制缺陷型腺病毒载体将I型单纯疱疹病毒胸苷激酶基因（HSV1-tk）转染入卵巢上皮性癌细胞株TYK中，观察抗肿瘤药物核苷类假物羟甲基无环鸟苷（GCV）和无环鸟苷（ACV）对带有HSV1-tk基因的TYK细胞的体外杀伤作用及是否诱导该细胞凋亡。方法 常规方法扩增、纯化重组腺病毒，聚合酶链反应（PCR）扩增检测HSV1-tk基因的表达，测定重组腺病毒的感染效率。观察腺病毒感染后，GCV、ACV对带有HSV1-tk基因的TYK细胞的杀伤作用，DNA片段分析及电子显微镜观察GCV作用后TYK细胞形态及细胞凋亡。结果 病毒大量扩增、纯化。PCR扩增可见长度为404bp的特异性条带。当感染复数为100时，腺病毒的感染效率为98.9%。GCV、ACV的浓度一定时，随着感染复数的增高，细胞生长抑制率升高；而感染复数一定时，随着GCV、ACV浓度的增加，细胞生长抑制率亦有明显的升高。电子显微镜观察及DNA片段分析可见，GCV作用后带有HSV1-tk基因的TYK细胞发生细胞凋亡。结论 复制缺陷型腺病毒载体可有效地将HSV1-tk基因导入TYK细胞中，GCV、ACV对带有HSV1-tk基因的TYK细胞有杀伤作用，杀伤的机理可能是细胞凋亡。