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GTP酶激活蛋白(Src同源结构域3)结合蛋白1在乳腺癌细胞MDA-MB-231体外迁移中的作用
引用本文:韩堃,黎燕,张宁. GTP酶激活蛋白(Src同源结构域3)结合蛋白1在乳腺癌细胞MDA-MB-231体外迁移中的作用[J]. 中国免疫学杂志, 2013, 29(5): 481-485
作者姓名:韩堃  黎燕  张宁
作者单位:1. 天津医科大学基础医学研究中心转化肿瘤学实验室,天津,300070
2. 军事医学科学院基础医学研究所分子免疫学研究室,北京,100850
基金项目:国家自然科学基金项目(项目编号:30801029)
摘    要:目的:研究GTP酶激活蛋白(Src同源结构域3)结合蛋白1[Ras-GTPase activating protein(Src homology domain 3)binding protein 1,G3BP1]在乳腺癌细胞MDA-MB-231体外迁移过程中的作用.方法:人乳腺癌细胞MDA-MB-231培养于RPMI1640培养基中;Western blot检测无表皮生长因子(Epidermal growth factor,EGF)刺激,以及10 ng/ml EGF分别刺激30秒、1分钟、2分钟和5分钟条件下乳腺癌细胞内G3BP1、蛋白激酶Cζ(Protein kinase Cζ,PKCζ)、Akt、pPKCζThin410/403及pAktSer473的表达水平;免疫共沉淀法检测乳腺癌细胞内G3BP1与PKCζ的相互作用;转染小干扰RNA抑制内源性G3BP1的表达;趋化实验和侵袭实验分别检测G3BP1抑制前后MDA-MB-231细胞穿过10 μm聚碳酸酯膜及人工基底膜的细胞数.结果:Western blot检测显示G3BP1在MDA-MB-231细胞内过表达;无EGF刺激时MDA-MB-231细胞内G3BP1,PKCζ与Akt均过表达,pPKCζThe410/403及pAktSer473不表达或低于Western blot检测下限;10 ng/ml EGF刺激后G3BP1、PKCζ与Akt表达水平不变,pPKCζThr410/403及pAktSer473的表达刺激时间增加而升高,至5分钟时达到峰值;在乳腺癌细胞内G3BP1与PKCζ具有相互作用;G3BP1表达抑制后乳腺癌细胞的趋化能力和侵袭能力均显著下降(P <0.05,P<0.05).结论:G3 BP1通过与PKCζ相互作用,在乳腺癌细胞MDA-MB-231的体外迁移过程中发挥重要作用.

关 键 词:G3BP1  乳腺癌  趋化  侵袭

Function of Ras-GTPase activating protein (Src homology domain 3) binding protein 1 in the in vitro migration of human breast cancer cell MDA-MB-231
HAN Kun , LI Yan , ZHANG Ning. Function of Ras-GTPase activating protein (Src homology domain 3) binding protein 1 in the in vitro migration of human breast cancer cell MDA-MB-231[J]. Chinese Journal of Immunology, 2013, 29(5): 481-485
Authors:HAN Kun    LI Yan    ZHANG Ning
Abstract:
Keywords:Ras-GTPase activating protein-(Src homology domain 3)-binding protein 1 (G3BP1)  Breast cancer  Chemotaxis  Invasion
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