| 幽门螺杆菌融合基因vacA-hpaA的克隆及在大肠杆菌和双歧杆菌中的表达 |
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| 引用本文： | 王国富,高峰,薛士鹏,吴利先.幽门螺杆菌融合基因vacA-hpaA的克隆及在大肠杆菌和双歧杆菌中的表达[J].中国现代医学杂志,2011,21(35). |
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| 作者姓名： | 王国富 高峰 薛士鹏 吴利先 |
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| 作者单位： | 大理学院基础医学院微生物学教研室,云南大理,671000 |
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| 摘 要： | 目的 构建幽门螺杆菌融合基因vacA-hpaA的大肠杆菌-双歧杆菌穿梭表达质粒,并观察其在大肠杆菌(E.coli)和双歧杆菌(B.bifidium)中的表达情况.方法 通过PCR得到hpaA-vacA融合基因,将该融合基因定向克隆到大肠埃希菌-双歧杆菌穿梭表达载体pGEX-1λT,构建重组质粒pGEX-hpaA-vacA,电穿孔转化入大肠杆菌BL21和双歧杆菌.转化菌经IPTG诱导,然后用SDS-PAGE和Western blotting方法鉴定表达的重组蛋白.结果 构建了重组质粒pGEX-vacA-hpaA,vacA-hpaA融合基因的分子量约为1548bp;经SDS-PAGE分析,在大肠杆菌中表达出85kD的融合蛋白,表达的蛋白约占细菌总蛋白的20.5％；在双岐杆菌中也能得到正确表达,但表达量较大肠杆菌低,占细菌总蛋白约8.5％.Western blotting结果确认了该条带为hpaA-vacA融合基因的产物.结论 构建的重组质粒pGEX-hpaA-vacA能够在大肠杆菌及双歧杆菌中获得表达.
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| 关 键 词： | 幽门螺杆菌 融合基因vacA-hpaA 双歧杆菌 大肠杆菌 表达 |
Cloning and expression of hpaA-vacA fusion gene of Helicobacter pylori in E.coli and B.bifidium |
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| WANG Guo-fu
,
GAO Feng
,
XUE Shi-peng
,
WU Li-xian.Cloning and expression of hpaA-vacA fusion gene of Helicobacter pylori in E.coli and B.bifidium[J].China Journal of Modern Medicine,2011,21(35). |
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| Authors: | WANG Guo-fu GAO Feng XUE Shi-peng WU Li-xian |
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