摘 要: | 构建新型的霍乱疫苗,应包含抗菌体和毒素两种抗原.脂多糖O-抗原是抗菌免疫中主要的保护性抗原,我们利用限制内切酶Sau3A将霍乱弧菌178(埃尔托生物型、小川血清型)染色体DNA,进行部分酶切后,分离大小为30~50Kb的片段,与经过BamH1酶切的柯斯质粒pHC79连接重组,通过体外包装系统形成噬菌体颗粒,感染受体菌E coliHB101,构建成霍乱弧菌178染色体基因文库.采用血清凝集试验及菌落固相ELISA方法,从基因文库中筛选到13株能够表达霍乱弧菌脂多糖O-抗原的阳性克隆.经热酚-水法从转化子中提取并纯化的脂多
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