抗BSA多克隆抗体和单克隆抗体筛选及双抗体夹心ELISA法的建立与验证

目的建立高灵敏度检测生物制品中牛血清白蛋白（BSA）残留量的双抗体夹心ELISA法并验证。方法筛选高亲和力、高纯度的抗BSA单克隆抗体作为包被抗体，高纯度、高效价、特异性高的兔抗BSA多克隆抗体为酶标抗体，采用双抗体夹心ELISA法，以系列含量的BSA标准品作为标准，制作标准曲线，对样品中所含BSA进行定量检测；并对该方法各项指标进行验证。结果优化确定了ELISA试验条件，回归曲线相关系数r≥0．99；对BSA最低检测限为1．25ng／ml；准确性试验回收率为90％-106％；精密性变异系数为6．1％～8．4％；与豚鼠、小鼠、兔、鸡血清均无交叉反应。结论该方法线性好，特异性强，灵敏度高，准确性、重复性和稳定性好。方法可靠，易于操作，适用于生物制品的BSA残留量定量检测。