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| 人重组TGF-β R Ⅱ亲和核酸筛选方法的建立 | |
| 引用本文： | 谢琳,刘韧,朱旭东,贺翔鸽,陈彩宇. 人重组TGF-β R Ⅱ亲和核酸筛选方法的建立[J]. 第三军医大学学报, 2008, 30(23): 2168-2171 |
| 作者姓名： | 谢琳 刘韧 朱旭东 贺翔鸽 陈彩宇 |
| 作者单位： | 1. 第三军医大学大坪医院野战外科研究所眼科,重庆,400042 2. 第三军医大学大坪医院野战外科研究所第二研究室,重庆,400042 3. 第三军医大学大坪医院野战外科研究所第一研究室,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆,400042 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金(30572008)~~ |
| 摘 要： | 目的通过筛选转化生长因子-β受体Ⅱ（TGF-βRⅡ）亲和核酸,探寻拮抗TGF-β活性的新方法。方法以ssDNA5′-TAATACGACTCACTATAGGGAGGACGATGCGG-N60-CAGACGACTCGCCCGA-3′为模板,体外转录获取初始RNA随机库;以人体外重组TGF-βRⅡ为靶目标蛋白行SELEX实验,共进行8轮循环筛选。通过膜结合实验监测筛选所得RNA富集库对TGF-βRⅡ亲和性的进化状态,凝胶阻滞实验检测亲和核酸序列与TGF-βRⅡ的结合强度。结果随着筛选进行,RNA富集库沿着与靶蛋白TGF-βRⅡ亲和性加强的方向进化;从第8轮富集库中分离出两类优势序列,序列A和序列B。膜结合实验显示序列A、B对TGF-βRⅡ有明显的亲和性,但凝胶阻滞实验显示序列A、B均无与蛋白结合的阻滞带出现。结论筛选所得序列A及B与靶蛋白TGF-βRⅡ的亲和性及特异性还不理想,但先导序列A及B的获得为通过后SELEX技术进一步寻找最佳结合序列奠定了基础。 |
| 关 键 词： | SELEX 人重组TGF-βRⅡ 先导序列 |
Screening of nucleic acids affinity to recombinant human TGF-β R Ⅱ |
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| XIE Lin,LIU Ren,ZHU Xu-dong,HE Xiang-ge,CHEN Cai-yu. Screening of nucleic acids affinity to recombinant human TGF-β R Ⅱ[J]. Acta Academiae Medicinae Militaris Tertiae, 2008, 30(23): 2168-2171 | |
| Authors: | XIE Lin LIU Ren ZHU Xu-dong HE Xiang-ge CHEN Cai-yu |
| Abstract: | |
| Keywords: | SELEX |
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