| 恶性疟原虫Pf332基因片段的克隆及表达 |
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| 引用本文： | 单志新,余新炳,马长玲,卞国武,吴忠道,徐劲.恶性疟原虫Pf332基因片段的克隆及表达[J].中山大学学报(医学科学版),2002,23(1):17-20. |
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| 作者姓名： | 单志新 余新炳 马长玲 卞国武 吴忠道 徐劲 |
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| 作者单位： | 中山医科大学寄生虫学教研室,广东,广州,510089 |
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| 基金项目： | 中山医科大学“2 11”重点学科建设课题基金资助项目 ( 9816 9)，广东省自然科学基金资助项目 ( 980 0 89)，教育部博士点基金资助项目 ( 93 186 ) |
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| 摘 要： | 【目的】构建含恶性疟原虫Pf332抗原基因片段的重组质粒 ,并检测在大肠杆菌BL2 1/DE3中的表达情况。【方法】应用PCR技术从FCC1/HN株基因组DNA中扩增Pf332基因 (Pf332 )片段 ,P332 R0、P332 R1、P332 R2 ,并分别插入pGEX 4T 1原核表达载体 ,阳性克隆的重组质粒DNA经酶切及PCR扩增鉴定。用DNAstar软件对FCC1/HN株与 3D7株Pf332的P332 R1、P332 R2片段进行同源性比较。由IPTG诱导在大肠杆菌BL2 1/DE3中表达重组蛋白。【结果】PCR扩增得到特异的FCC1/HN株Pf332片段 ,P332 R0、P332 R1、P332 R2 ,大小分别为 489、42 9和 393bp。酶切及PCR鉴定获得了正确的 pGEX P332 R0、pGEX P332 R1、pGEX P332 R2重组质粒。序列分析结果显示 ,与 3D7株相比 ,FCC1/HN株P332 R1、P332 R2片段编码多肽分别缺少 2、4个相应的重复单元。在大肠杆菌BL2 1/DE3中表达出 3个重组蛋白 ,相对分子质量分别为 46、44和 42。【结论】扩增、克隆了恶性疟原虫Pf332片段 ,P332 R0、P332 R1、P332 R2 ,并在大肠杆菌BL2 1/DE3中成功表达。FCC1/HN株与 3D7株的P332 R1、P332 R2片段编码多肽所包含的重复单元数目不同。
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| 关 键 词： | 疟原虫 恶性 抗原 Pf332 克隆 表达 |
| 文章编号： | 1000-257X(2002)01-0017-04 |
| 修稿时间： | 2001年6月13日 |
Cloning and Expression of Fragments of Pf332 Genes of Plasmodium falciparum |
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| SHAN Zhi xin,YU Xin bing,MA Chang ling,BIAN Guo wu,WU Zhong dao,XU Jin..Cloning and Expression of Fragments of Pf332 Genes of Plasmodium falciparum[J].Journal of Sun Yatsen University(Medical Sciences),2002,23(1):17-20. |
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| Authors: | SHAN Zhi xin YU Xin bing MA Chang ling BIAN Guo wu WU Zhong dao XU Jin |
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