| 大鼠GLUT3基因重组腺病毒载体的构建及鉴定 |
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| 引用本文： | 李方成,李军亮,吴中华,张培峰,黄文林,刘然义.大鼠GLUT3基因重组腺病毒载体的构建及鉴定[J].中华神经医学杂志,2006,5(11):1086-1089. |
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| 作者姓名： | 李方成 李军亮 吴中华 张培峰 黄文林 刘然义 |
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| 作者单位： | 1. 510120 广州,中山大学附属第二医院神经外科
2. 510060 广州,中山大学肿瘤防治中心实验室 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金（39900048）;广东省自然科学基金（010721） |
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| 摘 要： | 目的构建携带大鼠葡萄糖转运体3（GLUT3）基因的复制缺陷型重组腺病毒载体，为研究GLUT3的生物学功能提供工具。方法采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）的方法获取大鼠GLUT3基因全长cDNA片段，将其克隆至穿梭质粒pShuttle中构建穿梭质粒pShuttle-GLUT3，经酶切后与线性化的腺病毒骨架质粒pAdeno-X体外连接并转化大肠杆菌DH5α，构建重组腺病毒质粒pAd-GLUT3，酶切线性化重组腺病毒质粒后转染293细胞包装成重组病毒颗粒，重组腺病毒在293细胞中反复扩增数代后，分别用聚合酶链反应（PCR）及免疫印记法（western blot）的方法从基因和蛋白表达水平鉴定重组的腺病毒。结果经DNA测序和PCR分析显示GLUT3 cDNA序列正确。成功筛选出重组腺病毒质粒pAd-GLUT3后在HEK293细胞中成功包装出重组病毒，包装后冻融细胞行PCR及western blot检测表明重组腺病毒包装成功。结论本研究成功构建了携带大鼠GLUT3基因的复制缺陷型重组腺病毒载体。
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| 关 键 词： | 葡萄糖转运体3 基因克隆 重组腺病毒 |
| 文章编号： | 1671-8925（2006）011-1086-004 |
| 收稿时间： | 2006-04-14 |
| 修稿时间： | 2006年4月14日 |
Construction and identification of recombinant adenovirus vector carrying rat GLUT3 gene |
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| LI Fang-cheng,LI Jun-liang,WU Zhong-hua,ZHANG Pei-feng,HUANG Wen-lin,LIU Ran-yi.Construction and identification of recombinant adenovirus vector carrying rat GLUT3 gene[J].Chinese Journal of Neuromedicine,2006,5(11):1086-1089. |
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| Authors: | LI Fang-cheng LI Jun-liang WU Zhong-hua ZHANG Pei-feng HUANG Wen-lin LIU Ran-yi |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Glucose transporter-3 Gene clone Recombinant adenovirus |
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