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三七片DNA条形码分子鉴定及方法学考察
引用本文:魏妙洁,石林春,赵晴,央拉,徐晓兰,祖玛丽,李明玥,刘金欣,阿里穆斯. 三七片DNA条形码分子鉴定及方法学考察[J]. 中草药, 2020, 51(7): 1893-1900
作者姓名:魏妙洁  石林春  赵晴  央拉  徐晓兰  祖玛丽  李明玥  刘金欣  阿里穆斯
作者单位:中央民族大学药学院, 北京 100081;中国医学科学院 北京协和医学院药用植物研究所, 北京 100193;中国医学科学院 北京协和医学院药用植物研究所, 北京 100193;承德医学院 河北省中药研究与开发重点实验室, 河北承德 067000;西藏大学医学院, 西藏 拉萨 850000;福建农林大学动物科学学院(蜂学学院), 福建 福州 350002
基金项目:国家自然科学基金项目(81703659);国家自然科学基金项目(81503189);中国博士后科学基金资助项目(2017M610815);北京市自然科学基金资助项目(7202109)
摘    要:目的为研究DNA条形码技术在中成药鉴定中的应用,以三七片为研究对象,对方法的适用性、专属性与精密度进行考察。方法收集15批次市售三七片样品,考察三七片DNA提取条件,并对"中药材DNA条形码分子鉴定法指导原则"中PCR扩增、序列获得、结果判定等方法适用性进行确认;收集三七、人参、西洋参,制作三七片及其掺伪品,考察方法的专属性和重现性。结果三七片取样量100 mg,56℃水浴8 h所获得DNA的质量浓度平均值为60.7 ng/μL,PCR扩增、序列获得和结果判定均可获成功;三七、人参和西洋参的ITS2序列长度均为230bp,三七与人参、三七与西洋参的序列间均存在7个稳定的SNP位点,自制三七片和掺伪三七片均可成功获得ITS2序列,不同比例三七与人参、三七与西洋参的测序峰图在SNP位点处呈现相应峰高比的SNP套峰具备专属性;重复性、中间精密度和重现性考察符合《中国药典》2015年版(通则9101)相关要求。结论 ITS2序列作为DNA条形码能够稳定、准确鉴定三七片的原料药材,具备良好的专属性和精密度,三七片DNA条形码分子鉴定法将为保障三七片临床用药安全提供新的技术手段,并对《中国药典》其他收载单方制剂的鉴定提供参考。

关 键 词:三七片  三七  人参  西洋参  ITS2  鉴定
收稿时间:2019-10-06

Molecular identification of Sanqi Tablets using DNA barcoding and its methodological evaluation
WEI Miao-jie,SHI Lin-chun,ZHAO Qing,YANG L,XU Xiao-lan,ZU Ma-li,LI Ming-yue,LIU Jin-xin,BORJIGIDAI Almaz. Molecular identification of Sanqi Tablets using DNA barcoding and its methodological evaluation[J]. Chinese Traditional and Herbal Drugs, 2020, 51(7): 1893-1900
Authors:WEI Miao-jie  SHI Lin-chun  ZHAO Qing  YANG L  XU Xiao-lan  ZU Ma-li  LI Ming-yue  LIU Jin-xin  BORJIGIDAI Almaz
Affiliation:School of Pharmacy, Minzu University of China, Beijing 100081, China;Institute of Medicinal Plant Development, Chinese Academy of Medical Sciences&Peking Union Medical College, Beijing 100193, China;Institute of Medicinal Plant Development, Chinese Academy of Medical Sciences&Peking Union Medical College, Beijing 100193, China;Hebei Key Laboratory of Study and Exploitation of Chinese Medicine, Chengde Medical College, Chengde 067000, China;Medicinal College, Tibet University, Lasa 850000, China;College of Animal Science(College of Bee Science), Fujian Agriculture and Forestry University, Fuzhou 350002, China
Abstract:
Keywords:Sanqi Tablets  Panax notoginseng(Burk.) F.H.Chen  Panax ginseng C.A.Mey.  Panax quinquefolium L.  ITS2  identification
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