| 冻干重组人促黄体激素释放激素-绿脓杆菌外毒素A融合蛋白与不同细胞受体结合竞争试验 |
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| 引用本文： | 张国利,何畅,吴广谋,岳玉环,朱平.冻干重组人促黄体激素释放激素-绿脓杆菌外毒素A融合蛋白与不同细胞受体结合竞争试验[J].中国实验诊断学,2007,11(5):583-587. |
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| 作者姓名： | 张国利 何畅 吴广谋 岳玉环 朱平 |
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| 作者单位： | 中国人民解放军军事医学科学院11所,吉林,长春,130062 |
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| 基金项目： | 科技部科技型中小企业技术创新项目 |
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| 摘 要： | 目的为了验证重组人促黄体激素释放激素-绿脓杆菌外毒素A融合蛋白(LHRH-PE40)对癌细胞的靶向性,对LHRH-PE40进行125I标记,并进行了与多种细胞受体结合试验和竞争试验。为该药物的导向治疗提供可靠的依据。方法利用体外细胞培养方法将人胃癌细胞系BGC-823,人结肠癌细胞系Lovo,人T细胞淋巴瘤Hut102,人白血病细胞系Jurket,狗肾细胞系DK 5种细胞系,分别大量培养至单层,收获细胞,破碎,制备细胞膜。同时制备鼠肺组织的细胞膜进行试验。利用125I标记的LHRH-PE40与不同细胞膜进行放射性配基结合分析,以及与LHRH竞争结合分析。确定这些细胞表面有无LHRH受体,并用Scatchard作图方法计算出其亲和常数及最大结合量。结果小鼠肺组织细胞膜、人T细胞淋巴瘤Hut102、人白血病细胞系Jurket、狗肾细胞系DK未见配基-受体特异性结合及竞争结果;而人胃癌细胞系BGC-823,人结肠癌细胞系Lovo与LHRH-PE40的结合竞争符合特异性配基-受体结合、竞争特性。其中LHRH-PE40与Lovo细胞的Kd=10.6±2.33 nmol/L,Bmax=345±7.59 pmol/mg;与BGC-823细胞的Kd=37.82±1.42nmol/L,Bmax=475±17.86 pmol/mg。结论受试的6种细胞膜蛋白中正常细胞(鼠肺、狗肾)和两种肿瘤细胞(Jurket、Hut102)表面无LHRH受体表达。而结肠癌和胃癌肿瘤细胞表面存在LHRH受体的表达。另外本试验还证实了重组毒素LHRH-PE40保留了天然LHRH与其受体结合的高亲和力。
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| 关 键 词： | 放射性配基结合分析 亲和力 |
| 文章编号： | 1007-4287（2007）06-0583-05 |
| 收稿时间： | 2006-12-03 |
| 修稿时间： | 2006年12月3日 |
The Assay of LHRH-PE40 Binding and competition to Some Species Cells Receptor |
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| ZHANG Guo-li,HE Chang,WU Guang-mou,et al..The Assay of LHRH-PE40 Binding and competition to Some Species Cells Receptor[J].Chinese Journal of Laboratory Diagnosis,2007,11(5):583-587. |
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| Authors: | ZHANG Guo-li HE Chang WU Guang-mou |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | LHRH-PE40 |
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